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lhm_hnyj

金虫 (小有名气)

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[交流] 【求助/交流】引物是否合适已有4人参与

最近设计了三对引物Pa、Pb、Pc试着鉴别a、b、c三个种，采用相同的条件（50度退火）扩增了一次，得到的电泳图如下：右起为DL2000，引物Pc的空白，引物Pa分别扩增a、b、c，引物Pb分别扩增a、b、c，引物Pc分别扩增a、b、c。似乎仅C引物勉强为出现干扰，想请教大家有可能对扩增条件加以优化达到鉴别要求吗？这几对引物是否有希望派上用场呢

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1楼 2010-12-08 21:46:37

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

hnndpt

铁虫 (正式写手)

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性别: GG
专业: 植物遗传学

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流

引用回帖:

Originally posted by lhm_hnyj at 2010-12-13 19:52:13:

谢谢呀，提醒我了，我的目的片段较小，按理也该稍微加大点浓度的。还有我的胶少上半部分为什么会较下部分亮呢，溶液应该是混匀了的。
还有，这是我再用引物对a分别对a、b、c三个样本进行了梯度退火，电泳图如下 ...

胶上半部分比下半部分亮的原因：电泳时电压太高，EB朝正电荷方向移动，胶的下半部分的EB跑了，建议电压稍微低一点，多跑一会