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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】大肠杆菌越摇越清，怎么回事
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yangjunzju

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】大肠杆菌越摇越清，怎么回事

如题，最近我摇了几瓶大肠杆菌（重组菌，AMP抗性），OD600 nm能长到0.5，加入诱导剂后（两种质粒，分别用IPTG和阿拉伯糖诱导），发现半小时左右菌液开始变澄清，最后变成接近培养基颜色，里面有一些絮状物的沉淀，不知道是不是菌体死亡的残骸，但是继续培养（过夜，>8h)又能长出来。。。继续变混浊。。。这是什么原因呢，我百思不得其解。。还请各位指点！！非常感谢~
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1楼 2010-11-30 11:06:55
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)
★ ★ ★
yangjunzju(金币+1):谢谢参与
dhd997(金币+2):good 2010-11-30 15:07:40
还有一个可能就是毒蛋白的表达，这和你的IPTG加入正好符合

加入后毒蛋白表达，导致细胞死亡或活力下降，等iptg消耗降解了，或者一些不表达蛋白的菌长起来，有重新浑浊了

没看到具体情况，只能推测
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9楼2010-11-30 13:30:39
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leiyinwill

银虫 (小有名气)
★
yangjunzju(金币+1):谢谢参与
前一段时间我就出现过类似的问题，师兄给我分析可能是因为染菌了。我就重新划线，挑单克隆培养，最后扩大培养，每一步严格无菌操作，现在问题解决了。
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2楼2010-11-30 12:05:34
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skkyy88888

铜虫 (著名写手)
★
yangjunzju(金币+1):谢谢参与
重新做吧。严格把关。
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3楼2010-11-30 12:09:00
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空谷幽风

金虫 (正式写手)
★
yangjunzju(金币+1):谢谢参与
又没有可能受到噬菌体污染？
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5楼2010-11-30 12:26:53
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