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新虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】southern杂交求助！

本人正在做植物基因组的southern杂交以确定外源基因的拷贝数，用的是ROCHE的DIG High Prime DNA Labeling and Detection Starter Kit I。今天出了结果，十分郁闷，只有marker和阳性对照显色了，样品没有颜色。请看附图，跪求高人相助！！！

上图为提取的基因组DNA，以Hind111为marker

上图为酶切基因组后取出的5ul样跑胶看基因组是否被酶切完全，酶切体系为100ul

上图为转膜结束后检验转磨是否完全，残留的片段是较大的片段

上图为刚刚出来的结果，只有DNA marker和阳性对照显色，样品没有一个显色的
忙碌了一星期，却没有得到结果，十分郁闷，请经验人士给予帮助！！！

1楼 2010-11-28 15:42:42

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荣誉版主 (著名写手)

2009103158(金币+1): 2011-02-11 20:13:00

从你的酶切产物跑胶结果来看，你的基因组DNA降解了，因为你的条带不是上面亮下边暗，就是正好相反，高质量的基因组DNA酶切出来跑胶后是均匀的一片
1

好的酶切，电泳效果应该是这样，其中主要取决于DNA质量的好坏

2楼2010-11-28 17:07:14

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