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匿名

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yinsongna

金虫 (正式写手)


从18T上P下来,或者能切的话切下来直接用都可以啊
不大明白楼主想问什么
2楼2010-11-28 12:34:59
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匿名

用户注销 (著名写手)


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3楼2010-11-28 13:27:45
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fjt198719

木虫 (著名写手)


★ ★
amisking(金币+2):鼓励交流! 2010-11-28 15:26:03
T载体上有你相关的酶切位点的话,直接酶切下来,然后连接你的目的载体就行了。不过我从来不用T载体,因为T载体只是用于测序用,灰常准确。而如果你的基因5’端不是启动子+SD序列+6-11bp(具体不记得了)碱基间隔,额外的酶切位点可能对你目的基因的表达有影响,个人愚见!
4楼2010-11-28 13:41:43
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wmqouc

金虫 (著名写手)


★ ★ ★
amisking(金币+3):good! 2010-11-28 15:26:09
转基因的的话,就应该用表达质粒啊
pmd18-t是克隆载体
将你的基因从18-t上切下来转到表达质粒中,
然后将构建的重组表达质粒转转化到表达菌株中表达,就实现了转基因了
5楼2010-11-28 14:59:36
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ben1147

木虫 (正式写手)


pMD和你的目的表达载体要是酶切位点合适的话就切下来连
要是不合适的话要PCR
6楼2010-11-28 15:28:55
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yinsongna

金虫 (正式写手)


楼上的都回答你了。。
7楼2010-11-28 19:06:00
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