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【求助】HPLC检测黄酮的问题
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陈陈小颖子
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[交流]
【求助】HPLC检测黄酮的问题
各位虫子们好!我最近在检测某植物的总黄酮提取液,刚开始摸索条件时都好好的,几种成分分离都还可以,图如下(主要是我框起来的那几个峰):
四天后,同样的柱子,同样的流动相,总之就是所有条件不变,可是图像就成下面这样了:
.难道是我的柱子柱效降低了吗?可是这根柱子就我一个人用过,才进样30次左右啊.....很是郁闷,请各位虫子们帮我分析分析原因,能提供解决办法就更好了!感谢大家了!最后,祝还在做实验的虫子实验顺利,已经毕业工作了的工作顺利,总之一切顺利,不要郁闷!(事事不顺真的难受,我现在就这样.....)
[
Last edited by 陈陈小颖子 on 2010-11-26 at 20:02
]
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2010-11-26 19:56:46
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Kim★God
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qinhy(金币+1):多谢指教,欢迎常来药学版! 2010-11-29 09:59:41
最后用的95%水甲醇洗柱子?是甲醇95%吗?应该用纯甲醇洗吧,如有有水的话,保存的时候会不会影响柱效啊!
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11楼
2010-11-28 18:11:10
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heyugudu
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陈陈小颖子(金币+2):我之前就确定好方法了,改变流动相基本不现实了 2010-11-27 21:27:50
我们最近也出现这种问题了,你确定流动相的比例没有变化么?如果是摸索试验的话,建议你换种流动相试一下.
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2楼
2010-11-27 16:38:58
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陈陈小颖子(金币+2):梯度洗脱,安捷伦的柱子,最开始的10多次进样图形都是很好的,使用了柱温箱,每次使用完都会用95%水甲醇冲洗100分钟,因为我的流动相里面有冰醋酸 2010-11-27 21:31:10
什么方法?走梯度还是走等度?流动相是什么?比例?使用什么类型的色谱柱?是否使用柱温箱?每次实验结束后如何清洗色谱柱?
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3楼
2010-11-27 18:04:46
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znmznm
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★
陈陈小颖子(金币+2):我的流动相每天都是现配的..... 2010-11-27 21:32:10
qinhy(金币+1):多谢指教,欢迎常来药学版! 2010-11-29 09:58:56
可能是柱子清洗的问题,也有可能流动相需要重新制备
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4楼
2010-11-27 19:00:18
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