| 查看: 2254 | 回复: 14 | |||
[交流]
【求助】HPLC检测黄酮的问题
|
各位虫子们好！我最近在检测某植物的总黄酮提取液，刚开始摸索条件时都好好的，几种成分分离都还可以，图如下（主要是我框起来的那几个峰）： 四天后，同样的柱子，同样的流动相，总之就是所有条件不变，可是图像就成下面这样了:  .难道是我的柱子柱效降低了吗？可是这根柱子就我一个人用过，才进样30次左右啊.....很是郁闷，请各位虫子们帮我分析分析原因，能提供解决办法就更好了！感谢大家了！最后，祝还在做实验的虫子实验顺利，已经毕业工作了的工作顺利，总之一切顺利，不要郁闷！（事事不顺真的难受，我现在就这样.....)[ Last edited by 陈陈小颖子 on 2010-11-26 at 20:02 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
球磨粉体时遇到了大的问题，请指教！
已经有9人回复
-
江汉大学解明教授课题组招博士研究生/博士后
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求助各位，总黄酮含量测定方法用比色法和HPLC哪个更合适呢？
已经有16人回复
- TLC摸展开剂条件的问题
已经有15人回复
- 有效部位中结构确认的化合物含量在新药中的问题
已经有13人回复
- hplc非常诡异的问题-峰不见了
已经有13人回复
- 求助黄酮类苷元合成问题
已经有4人回复
- 黄酮类化合物的HPLC分析
已经有8人回复
- 【求助】体内分析时，大鼠血浆里检测不出来药物怎么办？急急急
已经有40人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
医学超声影像负责人招聘-中国科学院赣江创新研究院
+1/976
-
医学超声影像负责人招聘-中国科学院赣江创新研究院
+1/974
-
985教授征女友
+1/246
-
西湖大学拓扑光学、非厄米光学、太赫兹方向博士后招聘
+2/238
-
西湖大学拓扑光学、非厄米光学、太赫兹方向博士后招聘
+2/236
-
西湖大学拓扑光学、非厄米光学、太赫兹方向博士后招聘
+2/222
-
海法大学线上开放日
+1/47
-
清华大学深圳国际研究生院招聘-博士后（长期有效）
+1/38
-
香港中文大学医学院 诚聘 研究助理教授 (医工结合/生物信息学方向)
+1/32
-
大叔征婚
+1/17
-
南京医科大学国家级高层次青年人才团队招收博士后
+1/17
-
上海工程技术大学张培磊教授团队招收博士生
+1/7
-
全奖博士 英国利物浦大学 × 台湾清华大学 联合培养
+1/7
-
上海大学生物有机电子材料及器件团队博士研究生招聘
+1/7
-
电子科技大学李世彬课题组招聘传感器方向博士及博士后
+1/6
-
中北大学冯瑞教授*开山大弟子*招募
+1/6
-
澳科大药学院诚招2026年秋季药剂学/生物材料硕士研究生（2026年3月5日报名截止）
+1/4
-
墨尔本大学(QS13)急招CSC博士(补齐全奖)/访问学者/博士后(生物医学材料/器官芯片)
+1/4
-
26储能博士申请自荐
+1/1
-
苏州大学国家级青年人才团队2026年博士招生（有机光电功能材料方向）
+1/1
2楼2010-11-27 16:38:58
3楼2010-11-27 18:04:46
4楼2010-11-27 19:00:18
5楼2010-11-27 19:03:23
6楼2010-11-27 22:45:23
7楼2010-11-28 09:26:40
8楼2010-11-28 12:11:35
9楼2010-11-28 12:43:33
★
陈陈小颖子(金币+4):我是为了做指纹图谱。我用的时间已经达到120分钟了，梯度变化也不能再慢了，否则时间会更久，我完全看懂你的意思了，那些道理我也都明白，哎，对于那几个不能分开的峰我也很无奈，要想得到完美的图谱实在是太难了，我这两天把柱温升高了5度，感觉效果又要好些了。总之谢谢你了，能看我的求助帖并帮我分析问题我就很感动了！！好人会有好报，呵呵呵 2010-11-28 22:03:30
qinhy(金币+1):多谢指教，欢迎常来药学版！ 2010-11-29 09:59:26
陈陈小颖子(金币+4):我是为了做指纹图谱。我用的时间已经达到120分钟了，梯度变化也不能再慢了，否则时间会更久，我完全看懂你的意思了，那些道理我也都明白，哎，对于那几个不能分开的峰我也很无奈，要想得到完美的图谱实在是太难了，我这两天把柱温升高了5度，感觉效果又要好些了。总之谢谢你了，能看我的求助帖并帮我分析问题我就很感动了！！好人会有好报，呵呵呵 2010-11-28 22:03:30
qinhy(金币+1):多谢指教，欢迎常来药学版！ 2010-11-29 09:59:26
|
实验的目的是什么？含量测定？还是鉴别（很少看到用HPLC做鉴别的）？ 若是测定几个黄酮成分的总含量，第一张图也不能算是峰与峰分开了啊。第一张图的成分之间分离度是多少？若是刚好达到1.5，那么根据柱子使用的频率，是会出现第二张图的情况的。每次实验后的冲洗，是不能完全将柱子洁净程度达到跟原先一样的。冲洗柱子不够充分时，柱子寿命缩短寿命更快。植物样品成分多而复杂，柱子肯定是会受影响的。 如果不想改变原检测分析方法时，可微调流动相变化比例进行尝试。梯度，可在分析的目标成分的流动相比例适当调整。如：目标成分a在12min左右出峰，10——20min 流动相比例 A:B 20:80 可将此时适当调整，10——25min 流动相比例 A:B 20:80 或者调整流动相比例，不调整梯度时间，看看情况是否有变化。（不晓得我把意思说明白没，表达能力有点问题） LZ的意思是要分开那几个峰吧？ 个人看法，仅供参考。 |
10楼2010-11-28 17:48:34
11楼2010-11-28 18:11:10
12楼2011-08-02 22:48:23
13楼2011-08-09 17:25:43
14楼2011-08-09 17:59:32
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
|
本帖内容被屏蔽 |
15楼2011-08-09 20:03:38