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【求助/交流】离子交换层析怎么选择pH? 已有3人参与
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我在做蛋白质纯化，用的是DEAE-A50，请教各位，如何选择缓冲液pH啊？照书上说的用试管做了不同pH的预实验，从3.6到6.0可是结果都差不多，酶都能挂到胶上，用盐也能洗下来，并且除了6.0，其它pH的上清，也就是没有挂到胶上的还有大部分蛋白，可用考马斯亮蓝测出来，6.0上清几乎没有蛋白，也就是全挂到胶上了。 所以我选了5.4试一下，发现结果和预实验很不一样，用缓冲液洗的时候根本没有蛋白下来，用盐洗又有好多连峰，分不开，然后我又试了一下4.0，结果根本分不开，梯度洗得时候就一个峰，不过峰很漂亮  。亲们，给点意见吧！ |
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