24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 2693  |  回复: 10
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

piaoyuaaa

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】提取的DNA纯度不好 已有7人参与

最近一直在提细菌DNA,请问提取细菌DNA时需要无菌操作吗?提取的DNA,A260/A280总是大于2,有时比值都2.8,什么原因呢,刚开始用试剂盒提,比值1.1左右,后来用酚氯仿提取,比值却大于2,我是在超净工作台中操作的,有时会用酒精灯取样,难道因为温度太高使DNA降解太严重?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

peizhilee

金虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):鼓励交流 2010-11-15 08:48:53
还是要无菌操作的,混入很少的其他外源基因组DNA,很可能就会影响到实验结果。
一念成魔,一念成佛
7楼2010-11-15 08:45:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

phyllislhy

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+2):good! 2010-11-14 20:30:47
提取的时候不需要无菌操作,你提的DNA用试剂盒时是不是没有吹干就加水溶解,有机溶剂含量有点多,用酚氯仿提取DNA降解得很厉害,看你是做什么实验,一般的实验不需要追求1.8
2楼2010-11-14 15:51:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

piaoyuaaa

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by phyllislhy at 2010-11-14 15:51:22:
提取的时候不需要无菌操作,你提的DNA用试剂盒时是不是没有吹干就加水溶解,有机溶剂含量有点多,用酚氯仿提取DNA降解得很厉害,看你是做什么实验,一般的实验不需要追求1.8

不用无菌操作不会有外界杂菌干扰吗?我用的试剂盒是硅胶膜吸附的,最后一步DNA是用TE缓冲液把DNA从硅胶膜上洗脱下来的,好像不用吹干吧?我也不太清楚。还有就是酚氯仿提取的时候最后是用70%乙醇洗涤的,如果乙醇未干就加水溶解会不会对DNA的吸光度有影响?有怎样的影响呢?比值总大于2是代表DNA降解了吗?怎样预防降解?好多问题都不明白
3楼2010-11-14 21:22:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pushizi

木虫 (小有名气)

pushizi

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):鼓励交流。 2010-11-15 08:48:36
防止杂菌是因为你要培养,你提基因组时菌都死翘翘了,就是把里面的东西释放出来而已~杂菌没有关系的,除非你空气中漂浮着很多菌,混入你提的东西里,但是那也是占很少量的~
但愿快乐不停歇,悲伤不再来~
4楼2010-11-14 22:38:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 环境专硕调剂 +16 会说话的肘子 2026-04-06 16/800 2026-04-10 10:30 by asy1wn
[考研] 还有化工二轮调剂的学校吗 5+11 化工人999 2026-04-09 42/2100 2026-04-10 09:42 by 690616278
[考研] 291求调剂 +7 关忆北. 2026-04-09 8/400 2026-04-09 15:17 by 探123
[考研] 0860004 求调剂 309分 +7 Yin DY 2026-04-08 7/350 2026-04-09 14:06 by ditto77778
[考研] 265求调剂 +4 风说她早忘了 2026-04-07 4/200 2026-04-09 13:59 by only周
[考研] 0860004 求调剂 309分 +6 Yin DY 2026-04-09 6/300 2026-04-09 10:19 by 啊李999
[考研] 招收有机化学、化工,药学,食品灯专业学生 +3 yrfhjgdj 2026-04-08 3/150 2026-04-09 10:15 by QYQX_123
[考研] 材料考研求调剂总分280 +30 mkjlz1 2026-04-06 35/1750 2026-04-08 21:25 by cyh—315
[考研] 313求调剂 +3 十六拾陆 2026-04-07 3/150 2026-04-07 23:20 by lbsjt
[考研] 信工所11408 340分 本科西安交大自动化 +3 moontrek 2026-04-06 3/150 2026-04-07 09:56 by chongya
[考研] 071000生物学调剂 +7 拉提桃 2026-04-06 7/350 2026-04-06 18:55 by 52305043001
[考研] 求调剂到材料 +5 程9915 2026-04-06 5/250 2026-04-06 15:21 by yulian1987
[考研] 285求调剂 +8 AZMK 2026-04-04 11/550 2026-04-06 13:56 by BruceLiu320
[考研] 一志愿211生物学280分 求调剂 +5 李rien 2026-04-05 5/250 2026-04-06 10:30 by zhyzzh
[考研] 288求调剂 一志愿哈工大 材料与化工 +13 洛神哥哥 2026-04-03 13/650 2026-04-05 17:27 by zzx2138
[考研] 358求调剂 +7 秋gk 2026-04-04 7/350 2026-04-05 13:29 by huangmoli
[考研] 295求调剂 +4 A你好研究生 2026-04-04 5/250 2026-04-04 22:46 by yu221
[考研] 一志愿东北大学085901土木专硕345求调剂 +3 zxt11111 2026-04-04 3/150 2026-04-04 14:21 by 土木硕士招生
[考研] 一志愿中国石油大学化学工程323分求调剂 +4 化工专硕323分 2026-04-03 6/300 2026-04-03 22:12 by dongzh2009
[考研] 322求调剂 +4 FZAC123 2026-04-03 4/200 2026-04-03 20:55 by zhq0425
信息提示
请填处理意见