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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】PCR产物直接测序，怎么找不到引物？
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飘在海上的雪

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】PCR产物直接测序，怎么找不到引物？ 已有7人参与

我测了几组PCR产物序列，得到的比实际的少不少bp，找不到引物，怎么回事？
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1楼 2010-11-04 21:57:16
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taigongzaici

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by guixiaohua at 2010-11-05 11:49:24:
问题很简单啊，测序有30-40左右不准，PCR产物去测序，你引物刚好在这个区域，就没有你的引物啊，你要是连接其他载体上，再利用通用引物去测，就会有你的引物序列了。

说得对
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8楼2010-11-05 20:36:11
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yixuanwin

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
又不是克隆测序，怎么可能找到引物。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2010-11-04 22:55:27
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段家一凡

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):鼓励交流。 2010-11-05 08:40:39
要看你片段大小，小于一个测序反应的最高限的长度，还可以看到另一端的引物序列，如果太长（大于1K），就不可能了。
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2010-11-05 00:25:30
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hkfgwww

银虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+2):谢谢交流。 2010-11-05 08:40:49
如果是通用引物（根据载体设计）测序，可以看到自己设计的引物序列（根据目的基因设计）。如果使用的是自己设计的引物序列（根据目的基因设计），自然看不到引物序列了。
测序的原理是引物下一个碱基开始测定。
赞一下(2人) 回复此楼
微生物发酵
4楼2010-11-05 02:13:25
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