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【求助/交流】SDS-PAGE检测蛋白纯度
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求知的学生
金虫
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专业: 药物分析
[交流]
【求助/交流】SDS-PAGE检测蛋白纯度
已有11人参与
大家好,我现在有一些蛋白质的冻干粉,想用SDS-PAGE测一下纯度,应该如何做?胶跑完之后,该如何处理,怎么计算浓度?望不吝赐教,谢谢!
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1楼
2010-11-03 11:48:27
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求知的学生
金虫
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在线: 11.2小时
虫号: 810759
注册: 2009-07-17
专业: 药物分析
谢谢各位的热心解答!
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5楼
2010-11-03 17:12:16
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lxj341401
至尊木虫
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在线: 712.4小时
虫号: 111074
注册: 2005-11-20
专业: 生物化学
★ ★
求知的学生(金币
+1
):谢谢参与
dhd997(金币+1):鼓励交流。 2010-11-03 14:25:25
求知的学生(金币+1): 2010-11-03 17:11:00
蛋白粉加LOADING BUFFER后加热处理,再SDS-PAGE电泳,考马斯亮蓝或者银染,检测纯度。测浓度的话用考马斯亮蓝G250法595nm测定好了。具体操作一般的实验书上都有的。
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3楼
2010-11-03 14:21:56
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HarveyWang
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性别: GG
专业: 微生物生理与生物化学
★
求知的学生(金币
+1
):谢谢参与
楼上说得很全了,
另外建议,
如果自己没做过,还是找个此类实验室的好。
那些试剂自己配太麻烦了。
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【我一直认为做土匪很性感很坏,很直接,可以大声喊:JCMM我爱你!所以,我自从博士毕业后,就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
4楼
2010-11-03 16:10:59
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jhu132llh
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★ ★
小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):鼓励交流 2010-11-03 18:19:30
试剂可以购买试剂公司的,现成的并且质量有保证,尤其是当你对配溶液不是很擅长的时候。
很多时候就是在配溶液的时候让实验出现了问题,最后连分析问题的时候都不知道从哪里下手。
测定方法3楼讲得很清楚了,注意点操作就OK了,祝你成功
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青春的岁月,我们身不由己,只因这胸中燃烧的梦想!
6楼
2010-11-03 18:13:41
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