| 查看: 2872 | 回复: 15 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
gdongli8325铁杆木虫 (正式写手)
|
[交流]
【求助/交流】PCR产物A加尾
|
||
| 我是用Phusion 高保真酶做的PCR，但所用的载体是TA载体，所以需要A加尾。第一次我是这样做的：先用试剂盒将PCR产物纯化，然后加buffer, Taq, dATP，但是没有加上。后来分析可能是保真酶的内切酶活性还存在，于是就用酚、氯仿 将PCR 纯化，然后进行A加尾，但还是失败了。本来以为这是很简单的事情，但折腾了很久了。所以在此请教大家：究竟怎么样才能加上A尾巴？是否有既可以加上A又具有保真性的酶呢？因为要构建超表达载体，所以必须是保真的。 |
回复此楼» 猜你喜欢
为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种?
已经有5人回复
-
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》
已经有3人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有159人回复
-
求助 食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社 电子版
已经有5人回复
-
胶体几丁质的结晶度？
已经有0人回复
-
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士
已经有2人回复
-
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线
已经有5人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
TA cloning问题
已经有4人回复- 天根公司的Long Taq DNA Polymerase的PCR扩增产物是平末端还是带A尾巴？
已经有8人回复
- 重叠延伸 ，为什么用连接后的片段作为模板却扩不出来？
已经有12人回复
- 求助各位虫友--去除PCR产物中的3‘端A尾
已经有10人回复
- 关于PCR产物与pMD 19Tsimple连接的问题
已经有19人回复
- 【求助/交流】PCR产物切胶回收后可不可以加A尾,做TA克隆，急！希望高手们能帮帮忙！
已经有9人回复
- 【求助/交流】pfu扩出的片段回收后怎么加A
已经有12人回复
- 【专题】PCR实验技术指南
已经有535人回复
liyong1981 
金虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 774.1
- 散金: 116
- 帖子: 905
- 在线: 35.2小时
- 虫号: 357405
- 注册: 2007-04-27
- 性别: GG
- 专业: antibody
7楼2010-11-03 09:43:21
anlewo7777
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 5
- 应助: 12 (小学生)
- 金币: 1786.8
- 散金: 7
- 红花: 3
- 帖子: 341
- 在线: 108.3小时
- 虫号: 314883
- 注册: 2007-02-25
- 性别: GG
- 专业: 微生物
2楼2010-11-03 07:27:00
3楼2010-11-03 07:51:17
lixg
铁杆木虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 61 (初中生)
- 金币: 7627.1
- 散金: 1
- 红花: 7
- 帖子: 591
- 在线: 106.4小时
- 虫号: 859417
- 注册: 2009-09-29
- 专业: 发育生物学
4楼2010-11-03 08:42:35