24小时热门版块排行榜    

查看: 1556  |  回复: 6

apple1057

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】细胞复苏不成功,出现了一些问题。 已有4人参与

大家好,我们实验室的细胞最近出了些问题,每次复苏后都长得不好,形态改变而且不太增殖,最后在显微镜下观察,贴壁细胞很少,我们养的是PIEC细胞,以前都是消化后12小时就能长满,现在复苏后两天,丰度30%左右,我们实验都很注意,培养基.血清都换了,观察瓶内也没有污染,我想请教一下这是怎么回事?谢谢
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

happychou

新虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
如果是复苏一批次的细胞,考虑是冻存没有做好
2楼2010-10-28 22:50:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

apple1057

新虫 (初入文坛)

谢谢,我们复苏的细胞有-80冰箱保存的,有液氮保存的,复苏时冻存管里液体的颜色也不同,我想请教这个跟复苏成功有没有关系?
3楼2010-10-29 08:49:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

keilion

铜虫 (小有名气)

除非是同一批次的冻存液,否则它们的颜色总会有些差别的。估计还是细胞自身出了问题。
4楼2010-10-31 11:14:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jancy_king

新虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
可能是冻存的时候出问题了,一般细胞拿出来复苏不会怎么出问题的。冻存液最保险的方法是DMSO和小牛血清1:9。
5楼2010-11-01 13:00:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

happychou

新虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by apple1057 at 2010-10-29 08:49:24:
谢谢,我们复苏的细胞有-80冰箱保存的,有液氮保存的,复苏时冻存管里液体的颜色也不同,我想请教这个跟复苏成功有没有关系?

-80度一般可以保存三个月,而液氮中可以永久保存。冻存液的比例,DMSO:胎牛血清:培养基=1:2:7。冻存的时候要逐级降温,复苏的时候要迅速。由于冻存液中细胞数量不尽相同,所以颜色可以不一样
6楼2010-11-03 12:40:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

apple1057

新虫 (初入文坛)

谢谢,我想请问一下复苏时用10%FBS的话,会不会使细胞状态不好呢?
7楼2010-11-11 14:31:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 apple1057 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +11 kulium 2026-08-21 14/700 2026-08-24 02:12 by 流流伤
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +4 炎黄贵胄 2026-08-22 5/250 2026-08-24 02:09 by 流流伤
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +4 process2012 2026-08-23 5/250 2026-08-23 19:58 by jurkat.1640
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +24 yaoyewhu2008 2026-08-20 26/1300 2026-08-22 17:43 by kammury
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +13 ziyangfang 2026-08-19 16/800 2026-08-22 17:08 by WH3796
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +16 医学老男孩 2026-08-20 20/1000 2026-08-21 21:13 by Ldrop2023
[基金申请] 科研孤儿太难了 +17 我4大白菜 2026-08-20 18/900 2026-08-21 20:57 by zhangev
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
请填处理意见