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lij2

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】引物设计。金币可追加

我要做荧光定量PCR,本想让公司设计引物和探针,可现公司均只合成不设计。用primer express3设计出的引物和探针结果却是:                                                               
Forward Primer:CGGTACCACTAGTTCTAGAGAGCTCAA        TM        60
Reverse Primer:TTGCTTTATCAACTGCTGCTTTTT        TM        58
Probe:AAAACCAAGGCTTGAAAC    TM        69
首先TM值跟我在NCBI上BLAST的差距甚远,其次探针有点短,且离上游引物距离较长。实在是不知道能不能用。还请高手指教。多谢~~~
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lij2

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by dream7000 at 2010-10-09 09:44:21:
上海生工上海部就给设计,我的就是在那里设计合成的。设计好后还需自己在blast上面比对。
我的是生工设计完成后用primer5及blast都检测验证了,自己觉得好后才让他们合成的,我做real-time PCR用过引物还不错。注 ...

生工现在不提供设计,请问你是怎么验证的?拜谢
4楼2010-10-09 10:39:23
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