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xxk7235

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】请教逆转录的问题! 已有3人参与

请问大家细胞提取的总RNA做逆转录时,一条mRNA只会被转录成一条cDNA吗,还是会被多次转录?就是说产物cDNA的量与RNA的量是一一对应的吗?如果不是,那么为什么可以通过做定量PCR检测cDNA的量来反映mRNA的量呢?
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amilie030312

金虫 (正式写手)

你这个问题现在已经有人在开始考虑了,就是RT和PCR的真实性问题,原则上讲一条的RNA会被逆转录成一条的cDNA然后再PCR成两条DNA成为一条DNA的双连。但是实际情况是怎么样的根本没办法知道,所以PCR技术还是有一定缺陷的。也只能说我们人为的人为它是这样规则的变化的。
5楼2010-10-09 10:56:09
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临风7071

木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):感谢交流~ 2010-10-09 10:22:50
一般反转的时候,延伸在1h左右,反转录酶延伸能力强。所以,一条mRNA只被转录成一条cDNA,不会被多次转录
2楼2010-10-08 19:00:03
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临风7071

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
反转只有一次变性,引物不会再结合的
3楼2010-10-08 19:10:00
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