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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】请教逆转录的问题！
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xxk7235

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】请教逆转录的问题！ 已有3人参与

请问大家细胞提取的总RNA做逆转录时，一条mRNA只会被转录成一条cDNA吗，还是会被多次转录？就是说产物cDNA的量与RNA的量是一一对应的吗？如果不是，那么为什么可以通过做定量PCR检测cDNA的量来反映mRNA的量呢？
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1楼 2010-10-08 11:07:18
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临风7071

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):感谢交流~ 2010-10-09 10:22:50
一般反转的时候，延伸在1h左右，反转录酶延伸能力强。所以，一条mRNA只被转录成一条cDNA，不会被多次转录
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2楼2010-10-08 19:00:03
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临风7071

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
反转只有一次变性，引物不会再结合的
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2010-10-08 19:10:00
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xxk7235

新虫 (初入文坛)
多谢各位！
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4楼2010-10-09 09:10:31
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amilie030312

金虫 (正式写手)
你这个问题现在已经有人在开始考虑了，就是RT和PCR的真实性问题，原则上讲一条的RNA会被逆转录成一条的cDNA然后再PCR成两条DNA成为一条DNA的双连。但是实际情况是怎么样的根本没办法知道，所以PCR技术还是有一定缺陷的。也只能说我们人为的人为它是这样规则的变化的。
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5楼2010-10-09 10:56:09
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