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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】用涂布平抹总是污染怎么回事？金币不够会进行追加，长期有效
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419249049

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】用涂布平抹总是污染怎么回事？金币不够会进行追加，长期有效 已有2人参与

用涂布平抹法进行细菌的稀释平板计数，总是产生污染，怀疑是自己进行平抹时污染的，各位虫友有什么好的建议来避免它的发生吗?

附加信息：倒平板的时候自己能肯定没有问题；进行涂布时是在酒精灯附近进行操作的，酒精灯是一直点着的，这个实验自己做过了好多回，自己总是感觉涂布时出了问题。或者大家有没有更好的计数呢？
只要有好的回答，我会送金币的。谢谢各位虫友了！感激！

[ Last edited by 419249049 on 2010-10-8 at 13:09 ]
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1楼 2010-10-08 08:48:59
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lu_zl

银虫 (小有名气)
419249049(金币+1):谢谢 2010-10-08 09:02:02
涂布工具灭菌不彻底的可能性比较大
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2楼2010-10-08 08:58:50
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cheauyn

铁杆木虫 (正式写手)
419249049(金币+1):谢谢2楼的朋友 2010-10-08 09:05:11
将涂布棒单个包好灭菌，用的时候涂布棒不要碰到平板以外的地方。应该没有问题啊，之前都是这么做的啊。
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3楼2010-10-08 09:02:41
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419249049

木虫 (正式写手)
我是楼主，有好的答案的话，还可以追加金币，请虫友多多帮助了！
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4楼2010-10-08 09:04:41
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yyshea

木虫 (正式写手)
419249049(金币+1): 2010-10-08 10:12:29
信息不太多，不好说，一般新手的主要问题在于倒平板的时候出问题，特别是开盖放在无菌台上晾干最容易染。楼主多给点信息大家帮你分析一下吧
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5楼2010-10-08 10:00:47
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zking5129

铁虫 (初入文坛)
★
419249049(金币+1): 2010-10-08 10:12:34
lstt09nk(金币+1):鼓励下~ 2010-10-08 11:48:31
首先确保你稀释的时候没有染菌，保证无菌操作，涂布的时候注意涂布铲酒精灯灭菌，还有要开着酒精灯，在酒精灯火焰附近涂布，保证无菌环境。
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6楼2010-10-08 10:01:03
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propanediol

银虫 (正式写手)
★ ★ ★
419249049(金币+3):十分感激！ 2010-10-08 13:04:33
lstt09nk(金币+3):感谢交流~ 2010-10-08 14:44:36
涂布器用来分离细菌可以，用来计数的话就很差。

主要原因是：
1 涂布器灭菌不彻底 一般用酒精浸泡，不能杀灭细菌。烧的话可能导致玻璃棒断裂；
2 涂布器不能保证涂抹的均匀；

一般菌落计数的涂布办法是采用玻璃珠

将玻璃珠灭好后，用报纸包住备用。 每次使用4-8个珠子，摇5分钟，能够保证涂布效果，

这是医院和研究人员最可靠的办法。
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心态一定要好！
7楼2010-10-08 12:41:16
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沙砾

419249049(金币+1): 2010-10-08 13:11:48
涂平皿前，1、先用紫外照超净台20min以上；2、涂平皿的菌液要确保没有污染；3、涂平皿的棉棒要严格灭菌，最好是灭了就用；4、严格在超净台操作，必须点酒精灯；再污染就是自己操作的问题了
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8楼2010-10-08 13:08:52
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virus2009

金虫 (正式写手)

人称 龙哥
★
419249049(金币+1):谢谢参与
可以用硬一点铁丝自己制作涂布器，这样的话可以在涂布之前用火焰灼烧彻底除菌，等自制涂布器冷却后进行涂布。
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virus
9楼2010-10-08 14:28:58
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主
★ ★
419249049(金币+1):谢谢参与
lstt09nk(金币+1):有道理矣~ 2010-10-08 14:45:09
多做几个阴性对照，排除一下
赞一下(2人) 回复此楼
10楼2010-10-08 14:38:35
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