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luckydong1

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[交流] 【求助/交流】为什么用纯化的PCR产物就扩不出来？？？已有13人参与

各位大侠们好，请教一个问题，同样的基因，用未纯化的PCR产物和克隆质粒做模板都能P出目的片段，可是用胶回收纯化的PCR产物做模板却P不出来，请问是什么原因？望赐教

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1楼2010-09-29 23:00:11

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luckydong1

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引用回帖:

Originally posted by amilie030312 at 2010-09-30 12:32:09:
如果完全没有条带有可能根本就没回收回来，或者回收回来的条带不对，一般纯化回收的样本要稀释后才能够做普通PCR的样本来使用，否则样本浓度太大了，也扩不好的。乙醇残留也会有影响啦。
你中间有酶切的步骤没， ...

谢谢指教。我的片段是很亮的，而且没有杂带，回收之后的样本也稀释了十倍才做模板的，但是P出来的是弥散带，这么说来，应该是乙醇残留？？再次谢谢指教