应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】为什么用纯化的PCR产物就扩不出来？？？
汕头大学海洋科学接受调剂
51/1返回列表
查看: 2346  |  回复: 14
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

luckydong1

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】为什么用纯化的PCR产物就扩不出来？？？ 已有13人参与

各位大侠们好，请教一个问题，同样的基因，用未纯化的PCR产物和克隆质粒做模板都能P出目的片段，可是用胶回收纯化的PCR产物做模板却P不出来，请问是什么原因？望赐教
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-09-29 23:00:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

amilie030312

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):鼓励交流~ 2010-10-09 10:42:13
如果完全没有条带有可能根本就没回收回来，或者回收回来的条带不对，一般纯化回收的样本要稀释后才能够做普通PCR的样本来使用，否则样本浓度太大了，也扩不好的。乙醇残留也会有影响啦。
你中间有酶切的步骤没，看看是不是酶切的时候酶不好，有核算外切酶活性，把末端切掉啦
赞一下(2人) 回复此楼
5楼2010-09-30 12:32:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答

zking5129

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
是不是有可能在胶回收的时候，乙醇没有晾干或者纯化后模板浓度变的太低了？没遇到过这种情况，只是猜测。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2010-09-30 08:52:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yixuanwin

铁杆木虫 (正式写手)
★
lstt09nk(金币+1):有这种可能~ 2010-10-09 10:41:52
最大可能 乙醇残留了。

其次  其他操作失误。
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2010-09-30 09:53:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

寂寞之巅

铁虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我也遇到过同样的情况，能P出来，但是量很少。
恳请大虾赐教
赞一下(1人) 回复此楼
好好学习，天天向上
4楼2010-09-30 12:20:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 生物学调剂 +5 纸扇zhishan 2026-04-13 5/250 2026-04-14 10:17 by dick_runner
[考研] 290求调剂 +19 luoziheng 2026-04-10 19/950 2026-04-14 09:52 by zhoujxmail
[考研] 085600材料与化工349分求调剂 +16 李木子啊哈哈 2026-04-12 17/850 2026-04-14 09:11 by fenglj492
[考研] 考研求调剂 +4 ban班小七 2026-04-11 4/200 2026-04-14 09:09 by zs92450
[考研] 求调剂 +15 雪逢冬 2026-04-10 15/750 2026-04-14 08:47 by 木木mumu～
[考研] 材料085601调剂 +32 何润采123 2026-04-10 34/1700 2026-04-14 08:47 by 木木mumu～
[考研] 279求调剂 +11 张番茄不炒蛋 2026-04-11 11/550 2026-04-13 22:25 by zhq0425
[考研] 0854调剂 +10 长弓傲 2026-04-12 13/650 2026-04-13 17:32 by 长弓傲
[考研] 266调剂 +10 daya sun 2026-04-07 11/550 2026-04-13 10:12 by fenglj492
[考研] 085410 273求调剂 +10 X1999 2026-04-09 10/500 2026-04-12 09:24 by 逆水乘风
[考研] 085506-求调剂-285分 +3 雷欧飞踢 2026-04-08 3/150 2026-04-11 08:37 by zhq0425
[考研] 考研调剂 +26 硕星赴 2026-04-09 27/1350 2026-04-10 22:24 by 猪会飞
[考研] 263能源动力专硕求调剂 +4 加大号饭盒袋 2026-04-10 4/200 2026-04-10 20:52 by gong120082
[论文投稿] mdpi小修rvr时间四五天了 20+3 哈哈high 2026-04-08 5/250 2026-04-10 16:02 by 北京莱茵润色
[考研] 本科西工大 0856 324求调剂 +10 wysyjs25 2026-04-09 11/550 2026-04-10 08:37 by 5268321
[考研] 考研调剂 +13 冰冰，，， 2026-04-07 13/650 2026-04-09 17:01 by Lilly_Li
[考研] 286求调剂 +19 Faune 2026-04-08 20/1000 2026-04-09 08:36 by 哦哦123
[考研] 求调剂，现在还能填的 +3 上岸小莹加油 2026-04-08 3/150 2026-04-08 14:30 by zhq0425
[考研] 275 求调剂 +8 Lei812514 2026-04-07 8/400 2026-04-08 12:46 by chemisry
[考研] 318求调剂 +5 李青山山山 2026-04-07 5/250 2026-04-07 18:24 by 蓝云思雨
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭