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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】关于超声破碎大肠杆菌的问题
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ak47maomao

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于超声破碎大肠杆菌的问题 已有2人参与

实验中，目的蛋白在大肠杆菌以包涵体形式存在，用超声破碎的方法裂解细胞。采用的设置为： 100W左右， 超声 15s ， 间隔 20s ， 20min， 更换冰水后，再同样超声20min， 即总共超声了40min。离心后发现沉淀为褐色其中杂有少许黑色。

这是不是说明超声的功率过了？如果过了的话，会影响到后续的用8M尿素溶解包涵体吗？
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lifegoeson
1楼 2010-09-24 20:34:08
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月月大可

木虫 (著名写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
silicare(金币+2):谢谢参与 2010-09-25 08:34:40
碳化，是超声过的一种标志。不过量少不会有太显著的影响。

我平常超声要的是上清，如果一点碳化的东西都看不到，一般超声的效果都不好，有大量的菌体没有破碎；而如果黑乎乎的一堆，一般菌体破碎的比较充分，但是显然是过了点，对蛋白不太好。不过你的包涵体，个人认为影响不会很大。
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2楼2010-09-24 22:54:28
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ak47maomao

铁虫 (小有名气)
恩，谢谢了~
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lifegoeson
3楼2010-09-25 12:58:02
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