24小时热门版块排行榜    

查看: 2003  |  回复: 13

zsm0507

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】ELIsa间接法中,如何提高阳性值? 已有1人参与

ELIsa间接法中,如何提高阳性值,在抗原浓度不变的情况下?谢谢了
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zsm0507

金虫 (小有名气)

★ ★
lstt09nk(金币+2):感谢交流~~ 2010-09-25 21:43:08
lstt09nk:你可以把你的问题都整合到一楼,这样便于大家阅读~~ 2010-09-25 21:44:23
补充说明一下,我用自己的抗原包被的板子,用我自己的酶标二抗和显色液做,阳性值很低,为OD 0.5但是用我买的试剂盒中的酶标二抗和显色液做,阳性值却很高OD 1.4,这样看来我的抗原应该没问题,好像问题出在酶标二抗上,求大家帮着分析下吧
2楼2010-09-23 10:18:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yaojc

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
amisking(金币+2):鼓励交流! 2010-09-23 19:01:55
lstt09nk(金币+1):感谢参与~ 2010-09-25 21:43:21
zsm0507(金币+1): 2010-09-27 13:25:00
zsm0507(金币+1): 2010-11-23 10:26:39
如果你的酶标二抗质量好的话可以增加酶标二抗的使用浓度,即降低酶标的稀释度
专注、专心、专业
3楼2010-09-23 15:45:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

s1d2w2

木虫 (正式写手)

可以试一试三楼的方法
4楼2010-09-23 16:23:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zsm0507

金虫 (小有名气)

可是增加酶标二抗的浓度的话,阴性数也会提高的的呀?怎样才能使阳性值提高,而阴性值提高相对不多呢
5楼2010-09-24 09:34:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三妹妹

金虫 (小有名气)

★ ★
lstt09nk(金币+2):鼓励交流,欢迎常来~~ 2010-09-25 21:45:48
zsm0507(金币+3): 2010-09-27 13:24:27
引用回帖:
Originally posted by zsm0507 at 2010-09-23 10:18:10:
补充说明一下,我用自己的抗原包被的板子,用我自己的酶标二抗和显色液做,阳性值很低,为OD 0.5但是用我买的试剂盒中的酶标二抗和显色液做,阳性值却很高OD 1.4,这样看来我的抗原应该没问题,好像问题出在酶标二 ...

先要确定两种酶标二抗使用的是不是同一批包被的板,因为虽然是相同的抗原,可能两次包被不一样。
如果是同一批板,出现这种情况只能说明你的酶标二抗失活了,买新的二抗,按说明书上的稀释倍数稀释;
阴性对照有颜色很可能是没封闭好。
6楼2010-09-25 15:30:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

richujs

木虫 (正式写手)

zsm0507(金币+2): 2010-09-27 13:24:46
zsm0507(金币+1): 2010-11-23 10:27:36
酶标二抗效价低,或者浓度低;显色液显色效果不行,优化显色液。
只换二抗或者显色液试试看,就知道问题所在
思想是能力和力量的源泉
7楼2010-09-25 18:24:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zsm0507

金虫 (小有名气)

我自己的抗原,二抗,显色液
                  1        2                               
1:40000        0.536        0.66               
        0.288        0.173               
        0.422        0.476               
        0.156        0.495               
                  1              2
1:80000        0.406        0.452               
        0.184        0.106
        0.253        0.287               
        0.09        0.268
        1               2               
1:100000  0.365        0.372
              0.171          0.085
              0.271        0.247
              0.085         0.229
        我的抗原, 试剂盒二抗和显色液       
             1.205        0.936
         0.125        0.072
         0.425        0.433
         0.065        0.173
  试剂盒的抗原,我的二抗和显色液
   
    2   0.435

    6      0.111       
    7     0.082       
    8      0.122       

                                               
注:1.2均是阳性,其余345678是阴性,大家帮着分析下吧,感激不尽!
8楼2010-09-26 08:44:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zsm0507

金虫 (小有名气)

高手现身帮帮忙呀?
9楼2010-09-27 10:24:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三妹妹

金虫 (小有名气)

zsm0507(金币+2): 2010-09-28 13:16:46
zsm0507(金币+3): 2010-11-23 10:27:25
你的二抗是什么牌子的?我们买的sigma原装的也只是稀释一万倍,你稀释多了。
阴性是做的三个平行,可是平行性不好,OD0.2以下的视为阴性,因为超出了读数范围;
你封闭液是什么?底物用的是什么,TMB?
你用你的抗原加试剂盒的试剂做出来颜色浅这很正常的,因为抗原可能不同,最关键的是你的一抗都用的是一样的吗?
10楼2010-09-28 08:39:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zsm0507 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[文学芳草园] 梦想 +4 myrtle 2026-08-26 4/200 2026-08-31 08:43 by 逸域隐帆
[基金申请] 面上意见出来了 +10 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 19/950 2026-08-31 08:01 by blueearth171
[基金申请] 国社科又开始会评了,不知道这次命运如何 +5 雨打竹帘 2026-08-30 9/450 2026-08-30 22:23 by 余韵清
[基金申请] 为什么到现在没收到通知? +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +6 gdd2018 2026-08-28 11/550 2026-08-30 08:58 by 超级无敌华子
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +12 Kittylucky 2026-08-27 13/650 2026-08-29 00:04 by superceng
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 哪位高人中了,把查询到的截图贴出来让我看看,让我长长见识 +5 yuleib84 2026-08-26 6/300 2026-08-28 00:02 by yudaoqian88
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件,有关系吗? +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 国合现在查不到了吗? +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 牛来!米来!面来! +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
信息提示
请填处理意见