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zsm0507

金虫 (小有名气)

首先非常感谢您的耐心帮助!
阴性做的不是三个平行,6个阴性是不同的,但是不同的二抗浓度时,对应的阴性是相同的,我的封闭液用的是4%BSA,封闭1h,后来又用了一次10%FCS做过。
底物是TMB。
用试剂盒和用我自己的板子用的是六个同样的一抗。
请问用什么方法可以使阴性值降低些,阳性值提高些。在抗原不变的情况下?
11楼2010-09-28 13:15:31
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三妹妹

金虫 (小有名气)

阳性值是由你的抗原抗体间亲和力决定的,增加抗原抗体用量,或提高二抗浓度,但灵敏度可能会降低,你可以重新摸下工作浓度;
阴性值降低,你可以采用BSA封闭2小时看看,好像没听说有人用FCS封闭的,你可以尝试采用其他的封闭液,据我了解,用BSA封闭不是很好,可以试试脱脂奶粉;
再就是TMB本身时间长了就会略显色,你可以调整显色时间。

回帖是希望对你有帮助,也谢谢你的金币,不过没有金币我也会给你回的,因为我有问题也有好多虫友帮我的
12楼2010-09-29 09:16:59
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zsm0507

金虫 (小有名气)

好的,谢谢您了!
13楼2010-09-29 09:36:51
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飞雪迷影

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5): 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by yaojc at 2010-09-23 15:45:17:
如果你的酶标二抗质量好的话可以增加酶标二抗的使用浓度,即降低酶标的稀释度

那酶标二抗一般用什么来稀释呢
14楼2012-03-14 08:25:39
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