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zsm0507

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】ELIsa间接法中,如何提高阳性值? 已有1人参与

ELIsa间接法中,如何提高阳性值,在抗原浓度不变的情况下?谢谢了
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zsm0507

金虫 (小有名气)

首先非常感谢您的耐心帮助!
阴性做的不是三个平行,6个阴性是不同的,但是不同的二抗浓度时,对应的阴性是相同的,我的封闭液用的是4%BSA,封闭1h,后来又用了一次10%FCS做过。
底物是TMB。
用试剂盒和用我自己的板子用的是六个同样的一抗。
请问用什么方法可以使阴性值降低些,阳性值提高些。在抗原不变的情况下?
11楼2010-09-28 13:15:31
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zsm0507

金虫 (小有名气)

★ ★
lstt09nk(金币+2):感谢交流~~ 2010-09-25 21:43:08
lstt09nk:你可以把你的问题都整合到一楼,这样便于大家阅读~~ 2010-09-25 21:44:23
补充说明一下,我用自己的抗原包被的板子,用我自己的酶标二抗和显色液做,阳性值很低,为OD 0.5但是用我买的试剂盒中的酶标二抗和显色液做,阳性值却很高OD 1.4,这样看来我的抗原应该没问题,好像问题出在酶标二抗上,求大家帮着分析下吧
2楼2010-09-23 10:18:10
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yaojc

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
amisking(金币+2):鼓励交流! 2010-09-23 19:01:55
lstt09nk(金币+1):感谢参与~ 2010-09-25 21:43:21
zsm0507(金币+1): 2010-09-27 13:25:00
zsm0507(金币+1): 2010-11-23 10:26:39
如果你的酶标二抗质量好的话可以增加酶标二抗的使用浓度,即降低酶标的稀释度
专注、专心、专业
3楼2010-09-23 15:45:17
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s1d2w2

木虫 (正式写手)

可以试一试三楼的方法
4楼2010-09-23 16:23:41
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