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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】ELIsa间接法中，如何提高阳性值？
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zsm0507

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】ELIsa间接法中，如何提高阳性值？ 已有1人参与

ELIsa间接法中，如何提高阳性值，在抗原浓度不变的情况下？谢谢了
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1楼 2010-09-23 09:59:31
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三妹妹

金虫 (小有名气)
阳性值是由你的抗原抗体间亲和力决定的，增加抗原抗体用量，或提高二抗浓度，但灵敏度可能会降低，你可以重新摸下工作浓度；
阴性值降低，你可以采用BSA封闭2小时看看，好像没听说有人用FCS封闭的，你可以尝试采用其他的封闭液，据我了解，用BSA封闭不是很好，可以试试脱脂奶粉；
再就是TMB本身时间长了就会略显色，你可以调整显色时间。

回帖是希望对你有帮助，也谢谢你的金币，不过没有金币我也会给你回的，因为我有问题也有好多虫友帮我的
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12楼2010-09-29 09:16:59
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zsm0507

金虫 (小有名气)
★ ★
lstt09nk(金币+2):感谢交流~~ 2010-09-25 21:43:08
lstt09nk:你可以把你的问题都整合到一楼，这样便于大家阅读~~ 2010-09-25 21:44:23
补充说明一下，我用自己的抗原包被的板子，用我自己的酶标二抗和显色液做，阳性值很低，为OD 0.5但是用我买的试剂盒中的酶标二抗和显色液做，阳性值却很高OD 1.4，这样看来我的抗原应该没问题，好像问题出在酶标二抗上，求大家帮着分析下吧
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2楼2010-09-23 10:18:10
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yaojc

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
amisking(金币+2):鼓励交流！ 2010-09-23 19:01:55
lstt09nk(金币+1):感谢参与~ 2010-09-25 21:43:21
zsm0507(金币+1): 2010-09-27 13:25:00
zsm0507(金币+1): 2010-11-23 10:26:39
如果你的酶标二抗质量好的话可以增加酶标二抗的使用浓度，即降低酶标的稀释度
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专注、专心、专业
3楼2010-09-23 15:45:17
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s1d2w2

木虫 (正式写手)
可以试一试三楼的方法
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4楼2010-09-23 16:23:41
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