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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 【求助】HPLC出峰问题
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pang0807

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】HPLC出峰问题已有18人参与

请教下各位虫友~~本人用HPLC进样品，大概两三分钟就出峰，后面几乎没有峰了~而且分离效果也不好~峰没怎么分开（如图）我用的流动相是乙腈：水（20：80），检测波长273（通过紫外测出来的最大吸收波长），样品是用纯甲醇溶的~我用纯甲醇进过样，2、3分钟的峰好像也不是甲醇峰~~请教下各位虫友，这么早的峰到底能不能要啊？如果要的话怎样能把峰分开呢？十分感谢~~
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长乐未央
1楼2010-09-11 00:11:39
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lwhcay

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
为了确定下样品峰是否出来，可以断开柱子直接接检测器，积分算一下峰面积看看与两三分钟这些峰是否一致
如果确定了是样品峰，要调节流动相来增加保留时间，这个条件下保留太弱不可能与杂质分离
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10楼2010-09-11 21:19:17
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yangqiang10

金虫 (正式写手)

林风
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你的流动相怎么配的  ，纯甲醇进样也出来2，3分钟的峰？不解，能说明白点吗
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一切皆有可能
2楼2010-09-11 01:34:49
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bigpalewolf

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
把峰往后推推，10%乙腈，另外用50%乙腈溶解样品进样。
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3楼2010-09-11 03:07:31
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menghai

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
样品极性较大，减小流动相洗脱强度，或者加入其它试剂，增大样品保留时间和分离度
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4楼2010-09-11 11:11:04
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