应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】做western实验中问题请教
51/1返回列表
查看: 1768  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

andia

木虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】做western实验中问题请教

各位好
本人在做western blot实验时，样品准备好后，通过BCA法测定了蛋白浓度，上样时能过调整上样量使各样品间蛋白浓度保持一致
样品煮沸后有的样品有很大块的沉淀
最后点样时发现，有两个样品的颜色明显浅于其它的，最后结果也是显示这两个样品蛋白量明显少
明明是蛋白量一样的，不知道为什么会出现这种情况
有做过western blot实验的同学请帮忙出出主意，分析分析
谢谢大家了！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-09-09 21:34:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pidou213

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by andia at 2010-09-09 21:34:36:
各位好
本人在做western blot实验时，样品准备好后，通过BCA法测定了蛋白浓度，上样时能过调整上样量使各样品间蛋白浓度保持一致
样品煮沸后有的样品有很大块的沉淀
最后点样时发现，有两个样品的颜色 ...

你的“蛋白量一样的”是如何调整的呢？或许和调整方法有关呢
赞一下 回复此楼
见得多爱的多
8楼2011-01-10 09:04:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

dianaofyezi

金虫 (正式写手)
andia(金币+1): 2010-09-10 16:36:40
andia(金币+2):我是根据蛋白浓度调整成一样的了，能否具体说说你说的离子浓度是怎么回事？ 2010-09-10 16:38:16
与样品的离子浓度有关系，你可以将上样的浓度调整一样，然后体积少的用上样buffer补齐就行。
赞一下 回复此楼
52187644
2楼2010-09-09 22:09:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
andia(金币+3):离心过的了，buffer配的时间也不长 2010-09-10 16:37:31
通过蛋白裂解液收集蛋白之后有没有通过离心来去除杂质呢？
其次就是loading buffer有没有过期……
赞一下 回复此楼
3楼2010-09-09 22:53:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

evan1987

铜虫 (小有名气)
andia(金币+3):为什么这么说，能否具体说明下？ 2010-09-10 16:38:53
你蛋白变性不充分啊。
赞一下 回复此楼
5楼2010-09-09 23:03:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭