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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】氨基酸突变
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C-JingX

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】氨基酸突变 已有1人参与

我做一个基因的PCR后测序，发现有3个氨基酸突变了，想问一下如何查看该氨基酸突变是否是关键性位点突变啊比如Arg变为Cys，Thr变为Ala，Pro变为Ala，帮忙分析一下，谢谢
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1楼 2010-09-02 10:29:42
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violet.zhou

木虫 (小有名气)
C-JingX(金币+2): 2010-09-02 11:19:41
看你基因表达后的蛋白是什么样的啊
还有看突变的是在什么位置，比如是不是在信号肽什么的
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2楼2010-09-02 10:40:57
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月月大可

木虫 (著名写手)
C-JingX(金币+2):谢谢，模板序列应该是没有问题的，而且我也是用的高保真酶，不知该怎么办？老师，可以加你吗 2010-09-02 14:37:23
不建议单纯的、以为信任NCBI上的氨基酸序列，提的序列本身都是通过翻转测序获得的，这个序列有些人是经过多次验证，有些人很随意就提交了。再说你的基因来源的物种也不一定和提交序列的物种完全相同，存在个别氨基酸差异算是正常现象。

如果你的模板序列是自己实验室经过多次验证获得的，可靠性比较高，那就很有可能是你做的过程中突变引起的，使用高保真酶。
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3楼2010-09-02 12:20:22
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dianaofyezi

金虫 (正式写手)
C-JingX(金币+1):你好，我是研一新生，关于关键位点这词是老板说的，好像是有些位点突变后对该蛋白的功能等会引起较大变化的意思吧 2010-09-02 14:41:01
不知道你指的关键位点是特指什么地方。如果这个蛋白由人曾经研究过相关蛋白功能的，那么可以比对他的蛋白，看突变点是否在他说的范围之内。如果没有那你就只能自己做突变，分别对突变后的蛋白和未突变的蛋白比较研究功能，看是否对实际功能有影响。
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52187644
4楼2010-09-02 12:27:31
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月月大可

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
也可以再选几个克隆送去测序，或者重新pcr然后再测序。如果你信任的模板的话！
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5楼2010-09-02 14:42:24
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