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ahaoli_86

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助】MTT--染菌迹象

求助:
我最近在做mtt实验,但是最近总出现这种结果就是加药后,在高浓度总有染菌迹象,低浓度没有问题,高浓度的A很大,甚至测不到,加入DMSO后之直接变为紫黑色,我的低浓度药物是从高浓度稀释过去的,另外做了两种细胞,均是如此,在高浓度有染菌迹象,但是低浓度基本没事。不明白为什么会出现这种现象,我的样品用0.22的膜滤过的,如果染菌应该整块板都染吧,因为操作是一样的,用的滤膜也是同时灭菌的。求助大虾!!!!万分感谢
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dhd997

荣誉版主 (文坛精英)

自由人,我型我秀!

优秀版主

还真是没见过。好好想想哪里染菌了?
人生不过几十年,成败荣辱都在天,是非恩怨莫在意,健康快乐最值钱,自古人间苦无边,看得高远境如仙,愿你不为凡事恼,轻松快乐每一天。
2楼2010-08-31 22:15:02
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tjegg

铁杆木虫 (著名写手)

1。你的药物溶液有无颜色?2。你如何判断染菌?3。建议使用MTT的升级产品MTS,水溶性,一次加20ul即可,省事方便。
除了你的亲人,没有人应该对你好,对你好的人,一定要珍惜。
3楼2010-09-01 08:23:56
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ahaoli_86

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by dhd997 at 2010-08-31 22:15:02:
还真是没见过。好好想想哪里染菌了?

我奇怪的就是高浓度的很浑浊,从下向上看,明显的染菌现象,但是低浓度的就好的多,基本澄清,虽然数据不太好,基本不能用,但是药物是从高浓度稀释到低浓度的,不明白为什么这样,另外我铺的板一块是从前往后铺,一块是从后往前铺,所以应该不是铺板的问题,现在一头雾水,打算从新做,请指教啊
4楼2010-09-01 14:36:22
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ahaoli_86

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by tjegg at 2010-09-01 08:23:56:
1。你的药物溶液有无颜色?2。你如何判断染菌?3。建议使用MTT的升级产品MTS,水溶性,一次加20ul即可,省事方便。

我的药物有颜色,是这和染不染菌没有关系吧,因为染菌的孔里明显的浑浊,而我认为没有染得是澄清的,另外我将我的过滤后的样品取高浓度和培养基37°培养,发现也浑浊
5楼2010-09-01 14:39:22
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tjegg

铁杆木虫 (著名写手)

ahaoli_86(金币+3):谢谢你帮我解答问题 2010-09-01 19:04:18
引用回帖:
Originally posted by ahaoli_86 at 2010-09-01 14:39:22:

我的药物有颜色,是这和染不染菌没有关系吧,因为染菌的孔里明显的浑浊,而我认为没有染得是澄清的,另外我将我的过滤后的样品取高浓度和培养基37°培养,发现也浑浊

我判断你的药物是否有点偏橙红或粉红色?如果这样就有关系了。
除了你的亲人,没有人应该对你好,对你好的人,一定要珍惜。
6楼2010-09-01 14:47:30
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ahaoli_86

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by tjegg at 2010-09-01 14:47:30:

我判断你的药物是否有点偏橙红或粉红色?如果这样就有关系了。

我的药物是淡黄色的,在视野中看起来有点褐色,我不明白的是,为什么高浓度全部染菌,低浓度有不染的,还有染菌之后培养基看起来是浑浊的啊,怎么和药物的颜色有关呢?谢谢了
7楼2010-09-01 19:03:49
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zzp530135

金虫 (小有名气)

自由人

是不是溶解度的问题呢?药物浓度高的析出来了!染菌没有,你在显微镜先看看呗,光从下往上看估计难以判断是否染菌吧!稳妥点,看看是不确定染菌了
做一只正常的虫虫
8楼2010-09-01 19:18:07
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zzp530135

金虫 (小有名气)

自由人

是不是溶解度的问题呢?药物浓度高的析出来了!染菌没有,你在显微镜先看看呗,光从下往上看估计难以判断是否染菌吧!稳妥点,看看是不确定染菌了
做一只正常的虫虫
9楼2010-09-01 19:18:18
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tjegg

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by ahaoli_86 at 2010-09-01 19:03:49:

我的药物是淡黄色的,在视野中看起来有点褐色,我不明白的是,为什么高浓度全部染菌,低浓度有不染的,还有染菌之后培养基看起来是浑浊的啊,怎么和药物的颜色有关呢?谢谢了

有条件将你的药物溶液,做一下紫外全波长扫描,主要看570nm处有无吸收峰?
除了你的亲人,没有人应该对你好,对你好的人,一定要珍惜。
10楼2010-09-01 19:19:21
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