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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药理学 » 【求助】MTT--染菌迹象
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ahaoli_86

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助】MTT--染菌迹象

求助：
我最近在做mtt实验，但是最近总出现这种结果就是加药后，在高浓度总有染菌迹象，低浓度没有问题，高浓度的A很大，甚至测不到，加入DMSO后之直接变为紫黑色，我的低浓度药物是从高浓度稀释过去的，另外做了两种细胞，均是如此，在高浓度有染菌迹象，但是低浓度基本没事。不明白为什么会出现这种现象，我的样品用0.22的膜滤过的，如果染菌应该整块板都染吧，因为操作是一样的，用的滤膜也是同时灭菌的。求助大虾！！！！万分感谢
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1楼 2010-08-31 21:08:05
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dhd997

荣誉版主 (文坛精英)

自由人，我型我秀！

优秀版主
还真是没见过。好好想想哪里染菌了？
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人生不过几十年，成败荣辱都在天，是非恩怨莫在意，健康快乐最值钱，自古人间苦无边，看得高远境如仙，愿你不为凡事恼，轻松快乐每一天。
2楼2010-08-31 22:15:02
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tjegg

铁杆木虫 (著名写手)
1。你的药物溶液有无颜色？2。你如何判断染菌？3。建议使用MTT的升级产品MTS，水溶性，一次加20ul即可，省事方便。
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除了你的亲人，没有人应该对你好，对你好的人，一定要珍惜。
3楼2010-09-01 08:23:56
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ahaoli_86

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by dhd997 at 2010-08-31 22:15:02:
还真是没见过。好好想想哪里染菌了？

我奇怪的就是高浓度的很浑浊，从下向上看，明显的染菌现象，但是低浓度的就好的多，基本澄清，虽然数据不太好，基本不能用，但是药物是从高浓度稀释到低浓度的，不明白为什么这样，另外我铺的板一块是从前往后铺，一块是从后往前铺，所以应该不是铺板的问题，现在一头雾水，打算从新做，请指教啊
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4楼2010-09-01 14:36:22
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ahaoli_86

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by tjegg at 2010-09-01 08:23:56:
1。你的药物溶液有无颜色？2。你如何判断染菌？3。建议使用MTT的升级产品MTS，水溶性，一次加20ul即可，省事方便。

我的药物有颜色，是这和染不染菌没有关系吧，因为染菌的孔里明显的浑浊，而我认为没有染得是澄清的，另外我将我的过滤后的样品取高浓度和培养基37°培养，发现也浑浊
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5楼2010-09-01 14:39:22
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tjegg

铁杆木虫 (著名写手)
ahaoli_86(金币+3):谢谢你帮我解答问题 2010-09-01 19:04:18
引用回帖:
Originally posted by ahaoli_86 at 2010-09-01 14:39:22:

我的药物有颜色，是这和染不染菌没有关系吧，因为染菌的孔里明显的浑浊，而我认为没有染得是澄清的，另外我将我的过滤后的样品取高浓度和培养基37°培养，发现也浑浊

我判断你的药物是否有点偏橙红或粉红色？如果这样就有关系了。
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除了你的亲人，没有人应该对你好，对你好的人，一定要珍惜。
6楼2010-09-01 14:47:30
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ahaoli_86

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by tjegg at 2010-09-01 14:47:30:

我判断你的药物是否有点偏橙红或粉红色？如果这样就有关系了。

我的药物是淡黄色的，在视野中看起来有点褐色，我不明白的是，为什么高浓度全部染菌，低浓度有不染的，还有染菌之后培养基看起来是浑浊的啊，怎么和药物的颜色有关呢？谢谢了
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7楼2010-09-01 19:03:49
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zzp530135

金虫 (小有名气)

自由人
是不是溶解度的问题呢？药物浓度高的析出来了！染菌没有，你在显微镜先看看呗，光从下往上看估计难以判断是否染菌吧！稳妥点，看看是不确定染菌了
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做一只正常的虫虫
8楼2010-09-01 19:18:07
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zzp530135

金虫 (小有名气)

自由人
是不是溶解度的问题呢？药物浓度高的析出来了！染菌没有，你在显微镜先看看呗，光从下往上看估计难以判断是否染菌吧！稳妥点，看看是不确定染菌了
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做一只正常的虫虫
9楼2010-09-01 19:18:18
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tjegg

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by ahaoli_86 at 2010-09-01 19:03:49:

我的药物是淡黄色的，在视野中看起来有点褐色，我不明白的是，为什么高浓度全部染菌，低浓度有不染的，还有染菌之后培养基看起来是浑浊的啊，怎么和药物的颜色有关呢？谢谢了

有条件将你的药物溶液，做一下紫外全波长扫描，主要看570nm处有无吸收峰？
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除了你的亲人，没有人应该对你好，对你好的人，一定要珍惜。
10楼2010-09-01 19:19:21
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