应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【分享】质粒的抽提
71/1返回列表
查看: 1161  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

vivihao

金虫 (小有名气)

[交流] 【分享】质粒的抽提 已有5人参与

发现一个现象和大家分享一下：碱裂解法抽提质粒，如果8000rpm集菌时，下面出现一些黑点，可能是一些别的菌，具体是什么菌不了解；当加入溶液三时，若上面出现较多泡沫，加入异丙醇沉淀时不出来白色的沉淀，说明摇菌没有成功，插入的目标质粒没有转化成功，培养基被其他的一些菌污染了。
不知道别的同学遇到这样的情况没？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-08-27 16:44:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jia1012428

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我个人觉得还是看电泳图比较把握。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2010-08-27 19:22:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

怎么都行

银虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
silicare(金币+1):有一定的道理 2010-08-27 20:37:07
加入异丙醇沉淀时不出来白色沉淀不一定是目的质粒没有转化成功，我曾经有一次遇到过这种情况：摇菌时间过长，菌液浓度太大，菌体量过多，导致第一步裂解菌体时裂解的不充分，最后质粒就提不出来。
遇到这种情况，可以增加每个步骤试剂的用量，或者减少菌体的使用量就可以解决。
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2010-08-27 20:11:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

434744419

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我的也提不出来 菌摇的很好 就是提不出来 加入P2就是不澄清！菌体少也不澄清
1请高手指点！以前都可以提出来。  是因为载体片段太大（13000bp）还是因为拷贝数太低啊！怎样解决！
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2010-08-28 20:21:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

434744419

金虫 (小有名气)

提不出来

我的也提不出来 菌摇的很好 就是提不出来 加入P2就是不澄清！菌体少也不澄清
1请高手指点！以前都可以提出来。  是因为载体片段太大（13000bp）还是因为拷贝数太低啊！怎样解决！
赞一下 回复此楼
5楼2010-08-28 20:22:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hkfgwww

银虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
如果8000rpm集菌时，下面出现一些黑点，可能是一些别的菌，具体是什么菌不了解

这个是如何判断出来的 ？
赞一下(1人) 回复此楼
微生物发酵
6楼2010-08-29 08:18:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

airzzy

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
还有个问题就是定量究竟是怎么样才比较准确呢？先跑电泳再定量吗？
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2010-08-31 17:57:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 vivihao 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 1Nb0IVlmV6v0 2026-11-11 3/150 2026-11-12 07:23 by HajghKOMynmz
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 6/300 2026-11-12 07:09 by 9fOTqj074tIg
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 7/350 2026-11-12 06:56 by 9fOTqj074tIg
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 czAiolzR0IJC 2026-11-10 7/350 2026-11-12 06:47 by 9fOTqj074tIg
[基金申请] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 czAiolzR0IJC 2026-11-10 8/400 2026-11-12 06:45 by 9fOTqj074tIg
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 czAiolzR0IJC 2026-11-10 5/250 2026-11-12 06:36 by 9fOTqj074tIg
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 czAiolzR0IJC 2026-11-10 8/400 2026-11-12 06:34 by 9fOTqj074tIg
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 G2rhSvqvhNzl 2026-11-10 5/250 2026-11-12 06:25 by 9fOTqj074tIg
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 G2rhSvqvhNzl 2026-11-10 5/250 2026-11-12 06:14 by 9fOTqj074tIg
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 C6CRn66RYYXS 2026-11-10 4/200 2026-11-12 05:52 by 9fOTqj074tIg
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 C6CRn66RYYXS 2026-11-10 7/350 2026-11-12 05:50 by 9fOTqj074tIg
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 YHiw1gou1Eda 2026-11-10 7/350 2026-11-12 05:41 by 9fOTqj074tIg
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 FChKX8meu1ds 2026-11-09 7/350 2026-11-12 05:19 by 9fOTqj074tIg
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 FChKX8meu1ds 2026-11-09 7/350 2026-11-12 05:19 by 9fOTqj074tIg
[考研] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +7 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 11/550 2026-11-12 05:08 by 9fOTqj074tIg
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 8/400 2026-11-12 04:57 by 9fOTqj074tIg
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 4/200 2026-11-12 02:23 by 9fOTqj074tIg
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +6 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 7/350 2026-11-12 00:44 by 9fOTqj074tIg
[考博] 申请环境，微生物方向博士 +3 浅笑09 2026-11-08 3/150 2026-11-10 12:44 by 可淡不可忘
[文学芳草园] 厉娜 +3 张丹枫1991 2026-11-09 5/250 2026-11-09 16:53 by 张丹枫1991
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭