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111602木虫 (著名写手)
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xp198766
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看天(金币+2):热心 2010-08-20 13:57:30
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在微生物多样性分析过程中,尤其是使用16SrDNA克隆文库法时,经常要构建系统发育树。本人在构建了多个成功以及不成功的发育树以后,算是小有收获吧。在这里跟大家分享一下。 用MEGA建树共有Neighbor-Joining、Minimum Evolution、Maximum Parsimony、UPGMA四种构建方法,其中用16S克隆文库做微生物多样性分析时通常用N-J法。N-J法中数学模型的选择有No.of Difference、P-distance、Jokes-Cantor、Kimura 2-Parameter、Tajima-Nei、Tamura 3-Parameter、Tamura-Nei、LogDet(Tamura Kumar)、Maximum Composite Likelihood共7个选项,其中,Maximum Composite Likelihood为默认选项。 通常在16S克隆文库做微生物多样性分析中常用的选项为Jokes-Cantor或Kimura 2-Parameter,以便于使分类相近的序列在树上的位置相近。但是,我在用自己的序列建树时,选择Jokes-Cantor和Kimura 2-Parameter均无法进行构建,错误提示分别为:These formulas cannot be applied if the argument in the logarithm approaches zero or becomes negative.(Kimura 2-Parameter)和 If the proportion of sites that are different (nucleotides, synonymous, or nonsynonymous) is greater than or equal to 75%, the Jukes-Cantor correction cannot be applied. (Jokes-Cantor),只有在用软件默认的选项即Maximum Composite Likelihood才能构建成功。 通过查看MEGA中的distance选项中的computer pairwise中各序列之间的n/l值,发现矩阵中有部分序列之间的相似性距离超出计算范围,于是,返回mas文件,删除部分聚类之后的纵向空格列,并调整在聚类后与大部分序列错位严重的序列的位置(可以删除,然后重新添加),再次进行聚类,然后树就建成了。 不知道大家还有没有碰到过其他问题,欢迎交流! 摘自网络 |
9楼2010-08-20 10:43:43
2楼2010-08-18 12:17:01
111602
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