应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】从蛋白胶里回收蛋白
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
171/2返回列表12下一页
查看: 2088  |  回复: 16
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

芝之

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】从蛋白胶里回收蛋白 已有7人参与

如题，该如何操作呢，请有经验的战友们介绍下
3Q~
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-08-17 11:25:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cpn

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+2):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-08-17 16:26:33
偶自己没做，不过看偶的师弟折腾了好几个月，看lz后面的目的是要干什么了咯~~
是SDS-PAGE中回收的话，SDS的除去很重要，如果是要MS分析的话。
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2010-08-17 14:53:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

芝之

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by cpn at 2010-08-17 14:53:30:
偶自己没做，不过看偶的师弟折腾了好几个月，看lz后面的目的是要干什么了咯~~
是SDS-PAGE中回收的话，SDS的除去很重要，如果是要MS分析的话。

我想做非变性电泳，然后条带回收，具体是怎么操作的呢，是透析袋什么的么？
赞一下 回复此楼
3楼2010-08-17 15:44:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sqhnsd

金虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+3):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-08-17 16:26:43
引用回帖:
Originally posted by 芝之 at 2010-08-17 15:44:55:


我想做非变性电泳，然后条带回收，具体是怎么操作的呢，是透析袋什么的么？

如果非变性的话，就不能用电洗脱了，因为你不能加电泳液进去，也就是不能接触SDS。你可以考虑扩散的方法将蛋白从胶中提出来（切碎胶，加入10倍胶体积的buffer,震荡过夜，回收率可能只有30%左右，这个胶不能染，染了之后蛋白沉淀在胶里面，很难出来）
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2010-08-17 15:52:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

芝之

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by sqhnsd at 2010-08-17 15:52:55:

如果非变性的话，就不能用电洗脱了，因为你不能加电泳液进去，也就是不能接触SDS。你可以考虑扩散的方法将蛋白从胶中提出来（切碎胶，加入10倍胶体积的buffer,震荡过夜，回收率可能只有30%左右，这个胶不能染， ...

非常感谢，我还是想问，如果我用电泳液不加SDS会怎么样
赞一下 回复此楼
5楼2010-08-17 16:36:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sqhnsd

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 芝之 at 2010-08-17 16:36:17:


非常感谢，我还是想问，如果我用电泳液不加SDS会怎么样

跑不动。SDS-PAGE之所以能跑，就是因为SDS-Protein complex带负电荷。你查一些native gel的方法，可以不用加SDS，但是需要加一些别的东西是蛋白带上电荷才能在胶里面运动。
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2010-08-17 16:46:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

芝之

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by sqhnsd at 2010-08-17 16:46:46:

跑不动。SDS-PAGE之所以能跑，就是因为SDS-Protein complex带负电荷。你查一些native gel的方法，可以不用加SDS，但是需要加一些别的东西是蛋白带上电荷才能在胶里面运动。

原来原理是这个，那那个用扩散的方法的，就是弄碎一些，然后震荡过夜，第二天离心去沉淀就可以了吧
赞一下 回复此楼
7楼2010-08-17 16:50:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sqhnsd

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 芝之 at 2010-08-17 16:50:09:

原来原理是这个，那那个用扩散的方法的，就是弄碎一些，然后震荡过夜，第二天离心去沉淀就可以了吧

能冻干吗？沉淀之后你还要损失好多呢？至少40%的蛋白要损失掉，越稀损失越多
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2010-08-17 17:42:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

芝之

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by sqhnsd at 2010-08-17 17:42:43:

能冻干吗？沉淀之后你还要损失好多呢？至少40%的蛋白要损失掉，越稀损失越多

实验室可以冻干，可是直接冻干的话，会参杂着胶的东西么？
赞一下 回复此楼
9楼2010-08-17 18:02:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sqhnsd

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 芝之 at 2010-08-17 18:02:11:

实验室可以冻干，可是直接冻干的话，会参杂着胶的东西么？

先离心，去除胶，然后搜集上清冻干
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2010-08-17 18:28:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 芝之 的主题更新
171/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂，一志愿 南京航空航天大学大学 ，080500材料科学与工程学硕 +3 @taotao 2026-03-26 4/200 2026-03-27 03:50 by wxiongid
[考研] 341求调剂 +7 青柠檬1 2026-03-26 7/350 2026-03-27 00:19 by wxiongid
[考研] 321求调剂 +5 材料cailiao 2026-03-21 5/250 2026-03-26 20:41 by fmesaito
[考研] 07化学280分求调剂 +8 722865 2026-03-23 8/400 2026-03-26 20:00 by 不吃魚的貓
[考研] 085602化学工程求调剂。 +4 平乐乐乐 2026-03-26 4/200 2026-03-26 17:57 by fmesaito
[考研] 考研调剂 +8 小蜡新笔 2026-03-26 8/400 2026-03-26 16:18 by dick_runner
[考研] 334分 一志愿武理 材料求调剂 +4 李李不服输 2026-03-26 4/200 2026-03-26 16:00 by 不吃魚的貓
[材料工程] 一志愿C9材料与化工专业总分300求调剂 +5 曼111 2026-03-24 6/300 2026-03-26 13:04 by 13756423260
[考研] 一志愿上海交大生物与医药专硕324分，求调剂 +6 jiajunX 2026-03-22 6/300 2026-03-25 23:05 by licg0208
[考研] 材料与化工304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-25 3/150 2026-03-25 19:03 by Ainin_
[考研] 347求调剂 +4 L when 2026-03-25 4/200 2026-03-25 13:37 by cocolv
[考研] 284求调剂 +15 Zhao anqi 2026-03-22 15/750 2026-03-25 12:51 by wht0531
[考研] 086003食品工程求调剂 +6 淼淼111 2026-03-24 6/300 2026-03-25 10:29 by 3Strings
[考研] 一志愿武理085500机械专业总分300求调剂 +3 an10101 2026-03-24 7/350 2026-03-25 00:00 by 山鬼0-
[考研] 材料专硕找调剂 +5 哈哈哈吼吼吼哈 2026-03-23 5/250 2026-03-24 19:07 by 了了了了。。
[考研] 333求调剂 +3 ALULU4408 2026-03-23 3/150 2026-03-23 19:04 by macy2011
[考研] 石河子大学（211、双一流）硕博研究生长期招生公告 +3 李子目 2026-03-22 3/150 2026-03-22 21:01 by 怎么释怀
[考研] 260求调剂 +3 朱芷琳 2026-03-20 4/200 2026-03-22 15:12 by 朱芷琳
[考研] 考研调剂 +3 呼呼？~+123456 2026-03-21 3/150 2026-03-21 20:04 by 无际的草原
[考研] 297求调剂 +3 喜欢还是不甘心 2026-03-20 3/150 2026-03-21 18:33 by 学员8dgXkO
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭