应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】从蛋白胶里回收蛋白
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
171/2返回列表12下一页
查看: 2085  |  回复: 16
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

芝之

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】从蛋白胶里回收蛋白 已有7人参与

如题，该如何操作呢，请有经验的战友们介绍下
3Q~
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-08-17 11:25:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cpn

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+2):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-08-17 16:26:33
偶自己没做，不过看偶的师弟折腾了好几个月，看lz后面的目的是要干什么了咯~~
是SDS-PAGE中回收的话，SDS的除去很重要，如果是要MS分析的话。
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2010-08-17 14:53:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

芝之

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by cpn at 2010-08-17 14:53:30:
偶自己没做，不过看偶的师弟折腾了好几个月，看lz后面的目的是要干什么了咯~~
是SDS-PAGE中回收的话，SDS的除去很重要，如果是要MS分析的话。

我想做非变性电泳，然后条带回收，具体是怎么操作的呢，是透析袋什么的么？
赞一下 回复此楼
3楼2010-08-17 15:44:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sqhnsd

金虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+3):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-08-17 16:26:43
引用回帖:
Originally posted by 芝之 at 2010-08-17 15:44:55:


我想做非变性电泳，然后条带回收，具体是怎么操作的呢，是透析袋什么的么？

如果非变性的话，就不能用电洗脱了，因为你不能加电泳液进去，也就是不能接触SDS。你可以考虑扩散的方法将蛋白从胶中提出来（切碎胶，加入10倍胶体积的buffer,震荡过夜，回收率可能只有30%左右，这个胶不能染，染了之后蛋白沉淀在胶里面，很难出来）
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2010-08-17 15:52:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

芝之

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by sqhnsd at 2010-08-17 15:52:55:

如果非变性的话，就不能用电洗脱了，因为你不能加电泳液进去，也就是不能接触SDS。你可以考虑扩散的方法将蛋白从胶中提出来（切碎胶，加入10倍胶体积的buffer,震荡过夜，回收率可能只有30%左右，这个胶不能染， ...

非常感谢，我还是想问，如果我用电泳液不加SDS会怎么样
赞一下 回复此楼
5楼2010-08-17 16:36:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sqhnsd

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 芝之 at 2010-08-17 16:36:17:


非常感谢，我还是想问，如果我用电泳液不加SDS会怎么样

跑不动。SDS-PAGE之所以能跑，就是因为SDS-Protein complex带负电荷。你查一些native gel的方法，可以不用加SDS，但是需要加一些别的东西是蛋白带上电荷才能在胶里面运动。
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2010-08-17 16:46:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

芝之

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by sqhnsd at 2010-08-17 16:46:46:

跑不动。SDS-PAGE之所以能跑，就是因为SDS-Protein complex带负电荷。你查一些native gel的方法，可以不用加SDS，但是需要加一些别的东西是蛋白带上电荷才能在胶里面运动。

原来原理是这个，那那个用扩散的方法的，就是弄碎一些，然后震荡过夜，第二天离心去沉淀就可以了吧
赞一下 回复此楼
7楼2010-08-17 16:50:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sqhnsd

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 芝之 at 2010-08-17 16:50:09:

原来原理是这个，那那个用扩散的方法的，就是弄碎一些，然后震荡过夜，第二天离心去沉淀就可以了吧

能冻干吗？沉淀之后你还要损失好多呢？至少40%的蛋白要损失掉，越稀损失越多
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2010-08-17 17:42:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

芝之

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by sqhnsd at 2010-08-17 17:42:43:

能冻干吗？沉淀之后你还要损失好多呢？至少40%的蛋白要损失掉，越稀损失越多

实验室可以冻干，可是直接冻干的话，会参杂着胶的东西么？
赞一下 回复此楼
9楼2010-08-17 18:02:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sqhnsd

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 芝之 at 2010-08-17 18:02:11:

实验室可以冻干，可是直接冻干的话，会参杂着胶的东西么？

先离心，去除胶，然后搜集上清冻干
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2010-08-17 18:28:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 芝之 的主题更新
171/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 351求调剂 +4 麦克阿磊 2026-03-24 4/200 2026-03-27 00:32 by wxiongid
[考研] 342求调剂 +3 加油a李zs 2026-03-26 3/150 2026-03-27 00:29 by wxiongid
[考研] 336材料求调剂 +7 陈滢莹 2026-03-26 9/450 2026-03-27 00:20 by wxiongid
[考研] 286求调剂 +3 lim0922 2026-03-26 3/150 2026-03-26 23:07 by 不吃魚的貓
[考研] 调剂 +4 柚柚yoyo 2026-03-26 4/200 2026-03-26 20:43 by fmesaito
[考研] 0703化学求调剂 +3 丹青奶盖 2026-03-26 5/250 2026-03-26 20:11 by macy2011
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +3 崔wj 2026-03-26 3/150 2026-03-26 19:57 by nihaoar
[考研] 086000生物与医药292求调剂 +6 小小陈小小 2026-03-22 9/450 2026-03-26 15:58 by dick_runner
[考研] 材料277求调剂 +5 min3 2026-03-24 5/250 2026-03-26 15:13 by zzll406
[考研] 085600 材料与化工 329分求调剂 +9 Mr. Z 2026-03-25 9/450 2026-03-26 10:36 by baoball
[考研] 302求调剂 +4 锦衣卫藤椒 2026-03-25 4/200 2026-03-25 16:29 by 功夫疯狂
[考研] 359求调剂 +3 王了个楠 2026-03-25 3/150 2026-03-25 12:50 by Dyhoer
[考研] 材料考研调剂生 +3 黄粱一梦千年 2026-03-24 3/150 2026-03-24 17:00 by barlinike
[考研] 材料292调剂 +8 橘颂思美人 2026-03-23 8/400 2026-03-24 16:33 by laoshidan
[考研] 求调剂一志愿武汉理工大学材料工程（085601） +5 WW.' 2026-03-23 7/350 2026-03-24 14:50 by sprinining
[考研] 280分求调剂 一志愿085802 +4 PUMPT 2026-03-22 7/350 2026-03-22 22:13 by 星空星月
[考研] 一志愿华中农业071010，总分320求调剂 +5 困困困困坤坤 2026-03-20 6/300 2026-03-22 17:41 by hxsm
[考研] 生物学调剂 +5 Surekei 2026-03-21 5/250 2026-03-22 14:39 by tcx007
[考研] 求调剂 +5 Zhangbod 2026-03-21 7/350 2026-03-22 13:13 by Zhangbod
[考研] 0805材料320求调剂 +3 深海物语 2026-03-20 3/150 2026-03-21 15:46 by 无际的草原
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭