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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】5'Race反复做不出来，该怎么办
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阳光金鱼唐

金虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】5'Race反复做不出来，该怎么办 已有20人参与

用TaKaRa的5'Full Race试剂盒扩5’端，目的片段1000bp左右，每次都是内外引物都扩不出任何条带（除了引物二聚体外）。我是严格按照说明书操作的，感觉步骤太长，颠来倒去的到最后什么都没有了，我该怎么办？


谢谢大家了，这是很久以前的帖子了，我早就做出来了，用的TaKaRa的盒子，用的TaKaRa的盒子

[ Last edited by 阳光金鱼唐 on 2011-7-5 at 11:25 ]
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1楼 2010-08-16 10:33:02
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jasco

木虫 (正式写手)
★
阳光金鱼唐(金币+1): 2010-08-17 10:54:47
reasonspare(金币+1):谢谢分享。 2010-08-18 06:08:41
1、保证rna完整性好，电泳检测
2、因为对rna有去磷去帽子加接头，操作很多，易降解，所以要格外当心操作
3、多设计几条引物再试试
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9楼2010-08-17 09:28:26
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ben1147

木虫 (正式写手)
★
silicare(金币+1):有参考价值~ 2010-08-24 12:52:45
5‘RACE确实不好做

RNA（cDNA）质量要有保证

或者引物再优化一下
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2楼2010-08-16 11:54:28
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liyong1981

金虫 (正式写手)
同情下~·~
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3楼2010-08-16 13:48:49
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snzydong

铁杆木虫 (著名写手)
★
silicare(金币+1):这也是常用解决方法~ 2010-08-24 12:53:21
可以换个试剂盒试试 或者重新提取RNA
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4楼2010-08-16 14:02:39
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