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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】转化过后为什么不长菌？？？？
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黄大牛

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】转化过后为什么不长菌？？？？ 已有5人参与

质粒上带有抗氨苄基因，转化过后涂氨苄板，带有目的基因的板上都没有长菌，而且郁闷的是在空载上居然长菌了。
   为什么啊？？？
    求助哪位达人解释下？？？？
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1楼 2010-08-02 09:18:54
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aaalisu

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你确定实验过程中没有混淆
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2楼2010-08-02 09:23:26
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liouwzh

木虫 (正式写手)
★
1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-08-02 11:13:29
说明连接效率太差，试试改善连接的方法。
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3楼2010-08-02 09:24:09
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黄大牛

铜虫 (初入文坛)
没有混淆
  
连接是T4DNA连接酶16度过夜的
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朝为田舍郎，暮登天子堂。将相本无种，男儿当自强。
4楼2010-08-02 09:36:25
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louli

铜虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-08-02 11:13:39
那空载体板子提取质粒之后又带吗？  那个没长可能是没转化进去啊 感受态是自己做的还是买的啊。要是自己做的话，转化效率低，而且中间注意的事情繁琐。
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5楼2010-08-02 09:55:57
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wmq682

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-08-02 11:13:53
感受态有问题，转化效率太低，重新做吧，严格一点
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6楼2010-08-02 10:02:58
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黄大牛

铜虫 (初入文坛)
感受态是买的，转化效率低的话，那么对照的也应该不长菌才是，但是对照长菌类，长的还挺多。
老板分析胶回收时乙醇没离干净可能影响连接，另外就是载体自连了，准备再用磷酸酶处理下再看看
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朝为田舍郎，暮登天子堂。将相本无种，男儿当自强。
7楼2010-08-02 11:09:46
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