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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】细菌DNA提取
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红旋风

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】细菌DNA提取 已有3人参与

细菌DNA提取实验，琼脂糖凝胶电泳没有条带，是不是说明DNA没有提取出来？起初几次一样的条件可是做出来了，可最近几次没有条带，望有经验者告之原因。
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1楼 2010-07-30 15:31:04
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hitliutao

银虫 (小有名气)
1949stone:maybe 2010-07-30 15:50:57
可能是DNA提取液时间长了失效了吧,重配试试
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2楼2010-07-30 15:39:09
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红旋风

铁虫 (小有名气)
我用的是试剂盒
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3楼2010-07-30 15:49:42
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惟我独尊

金虫 (小有名气)
不一定表示没提取出来，我也出现过这中现象 但之后做DGGE却有条带 可能是提出的DNA量少吧
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4楼2010-08-03 15:49:36
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桃子老好吃

金虫 (小有名气)
显色剂呢？
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5楼2011-09-17 23:52:44
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quiller2000

木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★
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dhd997(金币+3): 鼓励交流 2011-09-18 08:09:51
基因组DNA提取理论上细胞裂解了，就很容易分离出来的

如果你是用的吸附柱，确实需要考虑产量的问题，因为基因组DNA很长，洗脱的时候不大容易全部洗脱下来。如果你总是得率少，又是用来做PCR的，可以考虑用玻璃珠或者超声之后再上柱吸附洗脱，增加产率！

或者，你用磁珠好了，呵呵
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致良知
6楼2011-09-18 00:09:16
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瓶儿花

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
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dhd997(金币+2): 很活跃啊，继续鼓励 2011-09-18 08:10:08
有可能是裂解不充分导致吧，另外还有抽提的时候没有到位也会导致DNA提取不成功的。
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7楼2011-09-18 00:51:37
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461241086

新虫 (初入文坛)
★ ★
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dhd997(金币+1): 欢迎总结经验一起探讨 2011-09-20 07:59:00
我也碰到了和你一样的情况，不知道怎么回事。你找到你的原因了么
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8楼2011-09-19 19:17:39
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瓶儿花

金虫 (小有名气)
★ ★
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西瓜(金币+1): 鼓励交流 2011-09-20 18:02:52
抽提的时间长一点，没有没有抽提完全很可能会导致最后没有条带的，本实验室曾经出现过这样一个问题。
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9楼2011-09-20 17:21:34
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蓝月望宁

金虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★
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西瓜(金币+5, MolEPI+1): 分析很全面！哥们，好久不见啊！ 2011-09-21 17:06:17
没出现条带可从以下几点找原因：
1.你的菌株是否新鲜，菌株老化的话，核酸会自行降解。
2.没有提出DNA，原因可能是破壁破细胞膜不充分
3.从电泳条件上入手，可适当加大凝胶浓度，降低电压，延长电泳时间，染色后充分水洗后再检测
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坚持，一秒钟，就离，成功，近一步！
10楼2011-09-21 08:39:19
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