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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【分享】关于载体双酶切的一些经验
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swordhang

金虫 (小有名气)

[交流] 【分享】关于载体双酶切的一些经验 已有17人参与

双酶切时要是有一个酶酶切不完全时，就会导致载体自连

我的做法是用引物把载体pcr出来，再进行酶切，这样不管怎么样都不可能出现载体自连的情况，而且还省得提质粒了
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1楼 2010-07-29 23:15:07
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刘小乐

铜虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
看天(金币+2):鼓励一下 2010-07-30 10:49:15
方法不错的，不过有个疑问想请教一下，载体是环状质粒吗？引物怎么设计的？
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互动互利互相学习
7楼2010-07-30 10:30:31
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
★
lstt09nk(金币+1):是的 2010-07-30 09:59:14
载体小的时候还可以，如果载体大了PCR就不是很方便吧，不过这方法还真是标新立异。
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Thank-you，so-blue.
2楼2010-07-29 23:20:35
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w.king124

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
通过菌落PCR一般都能找到转化成功的菌株，这个方法还是第一次听说
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3楼2010-07-30 09:40:33
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zxping11230

铁虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
用引物PCR载体不现实！
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快乐的科研
5楼2010-07-30 10:24:41
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