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pushizi

木虫 (小有名气)

pushizi

[交流] 【求助/交流】绿色荧光蛋白时有时无怎么回事?已有4人参与

现在我用利用绿色荧光蛋白作为筛选标记,在一株非常规酵母中表达(细胞壁比较厚),但是用激发光激发看到的荧光很不稳定,是蓝色的,非常微弱,但是跟野生的菌有区别(野生菌有点微微的绿色,模模糊糊的)。不是荧光蛋白都应该是很亮的么,为什么我挑起来这么费劲,每次都要在显微镜底下看半天,才挑到一个。
按道理我挑取一个菌落进行观察,单菌落中的菌都是一样的啊?可我看到的是一个单菌落中的菌有的有荧光,有的却没有,而且荧光菌大多数在盖玻片的周围观察到。十分怀疑是否是因为边缘折射的光线导致荧光的产生的。而且更加让人郁闷的是,原先大多数有荧光的菌储存一段时间以后再划线,荧光都消失了。。。。。。。。。。。
这个实验做了快一年了,每次看显微镜看完头都特别疼,晕乎乎,却总是不能肯定到底这个荧光是能表达还是不能,各位高手,请您走过路过一定帮帮忙,哪怕是提点建议或者我有可能疏忽的地方也好。
再次先谢过!!!
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但愿快乐不停歇,悲伤不再来~
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leileihmr

新虫 (初入文坛)


pushizi(金币+1):谢谢参与
荧光过一段时间消失是正常现象吧
6楼2010-07-30 09:39:54
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