| 查看: 2880 | 回复: 18 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
【求助/交流】求助：那种方法提取RNA浓度比较高？ 已有13人参与
|
|||
|
本人拟构建个均一化cDNA文库，需要的RNA量比较多，因此需要比较高的浓度。采用安比奥的试剂盒提取出的RNA浓度太低了，在逆转录和扩增时间的PCR次数太多了，难以满足要求。但是看别人用TRzol抽提由于时间长，很容易降解。请问哪种方法或试剂盒比较好？麻烦指点下，谢谢！ [ Last edited by zzq770204 on 2010-7-29 at 21:18 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有298人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 【求助/交流】求助：试剂公司研发员考试
已经有4人回复
- 【求助/交流】求助：盐芥种子 急需
已经有3人回复
- 【求助/交流】求助：怎样选定基因
已经有4人回复
- 【求助/交流】求助：微藻是微生物还是植物
已经有15人回复
- 【求助/交流】求助：彗星实验
已经有7人回复
- 【求助/交流】求助：鸡血细胞DNA的提取
已经有4人回复
- 【求助/交流】求助：SHF的含义
已经有2人回复
- 【求助/交流】求助 ：急切！！
已经有13人回复
- 【求助/交流】求助：单链DNA含量检测
已经有3人回复
- 【求助/交流】求助：sigmaplot简体中文教程
已经有8人回复
- 【求助/交流】求助：overnight是指多长时间
已经有19人回复
- 【求助/交流】求助：糖肽类培养基
已经有5人回复
- 【求助/交流】求助：检测蛋白质问题？
已经有2人回复
- 【求助/交流】求助：SDS-PAGE垂直电泳
已经有4人回复
- 【求助/交流】求助：如何选择凝胶成像仪？
已经有11人回复
- 【求助/交流】求助：大规模测序
已经有7人回复
- 【求助/交流】求助： its鉴定序列分析
已经有2人回复
- 【求助/交流】求助：DNA的溶解
已经有7人回复
- 【求助/交流】求助：酵母感受态细胞的制备
已经有9人回复
- 【求助/交流】求助：dnaman软件
已经有2人回复
- 【求助/交流】求助：关于胶回收保存问题
已经有3人回复
- 【求助/交流】求助：叶面积测定
已经有30人回复
super1998
金虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1122.3
- 帖子: 243
- 在线: 158.6小时
- 虫号: 474412
- 注册: 2007-12-06
- 性别: GG
- 专业: 植物病理学
★ ★
zzq770204(金币+10):你是试剂公司还是？ 2010-07-24 20:17:18
zzq770204(金币+10): 2010-07-30 12:54:51
lstt09nk(金币+2):鼓励交流~~ 2010-08-02 17:18:22
zzq770204(金币+10):你是试剂公司还是？ 2010-07-24 20:17:18
zzq770204(金币+10): 2010-07-30 12:54:51
lstt09nk(金币+2):鼓励交流~~ 2010-08-02 17:18:22
|
首先不明白你扩增目的基因后为什么要纯化？扩完了可以直接电泳。 如果反转录可以扩增ACTIN，说明模板质量还行，但是没看到你的RNA，也不知道你的材料来源，因此无法确定能否满足建库的要求。 我给你几个建议，如果你的CDNA模板量足够大，可以选择1-2lu跑个电泳看看。如果看到清晰弥散条带，那就是扩增环节的问题，跟你的模板无关了。 试试看用其他模板是否可以扩增？修改一下你的PCR条件，特别是退火温度。 找公司做文库，犯不上，现在这个已经很普及了，如果实验室有钱可以选择，毕竟省事，我们这边5K-2w不等，看你要多大的文库了。 |
7楼2010-07-24 15:37:38
2楼2010-07-21 11:43:11
won7
金虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 954
- 散金: 55
- 帖子: 297
- 在线: 61.2小时
- 虫号: 19911
- 注册: 2003-07-30
- 性别: GG
- 专业: 水产资源与保护学
3楼2010-07-21 11:43:53
sunyongle1
木虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2638.8
- 散金: 1
- 帖子: 413
- 在线: 103.8小时
- 虫号: 1059232
- 注册: 2010-07-17
- 专业: 肿瘤发生
4楼2010-07-21 14:57:54
投票:
10