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闲花落地

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】求助:转化克隆后长出大片菌落? 已有5人参与

各位兄弟姐妹们:
兄弟最近在做克隆文库,针对环境样品扩增细菌16S基因,通过pMD19-T连接,转化到商品化的感受态细胞内。连接转化后吸取50ul涂在抗性平板上,培养16小时后出现满板的糊状菌苔,48小时后,可见很微小微小的菌落,非常奇怪?
后来我改涂10和20ul,培养16小时后,可见1个正常的菌落,其余全部为很微小微小的菌落?
请问有哪位同行遇到过类似情况,帮忙解决一下,小弟在此多谢了!
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刘小乐

铜虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
可能是菌种浓度太高了吧?一下取出菌种液稀释一下在涂板看看效果,顺便结合抗生素效价是否失效考虑下
互动互利互相学习
5楼2010-07-12 12:45:25
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