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【求助/交流】请问转染了GFP的肿瘤细胞?
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celeryliu
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[交流]
【求助/交流】请问转染了GFP的肿瘤细胞?
已有5人参与
请问用质粒转染了GFP的肿瘤细胞将其种植到小鼠身上后
GFP是随着细胞的增生复制还是平均分配到肿瘤细胞内,随着代数的增加,GFP会消失吗
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2010-07-08 22:10:35
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jurkat.1640
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小木虫(金币
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):给个红包,谢谢回帖交流
这取决于你的转染是不是瞬时转染。
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4楼
2010-07-09 08:43:08
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三磷酸腺苷
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dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-07-09 08:09:16
一般还是可以比较稳定遗传的(这里的遗传指的是子细胞也携带GFP),至少一个月
也就是你说的增生复制
但由于稳定株的染色体是被你插了东西进去的,所以可能在长期复制的过程中会出问题,但能够满足你的实验的,荷瘤顶多就一两个月
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2楼
2010-07-08 22:58:26
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celeryliu
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我是用质粒转染的,应该是稳转吧
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5楼
2010-07-09 09:02:11
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celeryliu
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那为什么有的同学说即使稳定转染也不能复制GFP
他的解释如下:
因为构建GFP质粒的时候用的是细菌的启动子,这个是经典的构建质粒的方法。真核细胞里面没有GFP质粒复制的材料,所以不能复制。代数往下传后,质粒的含量就越来越少,最后就检测不到荧光了。用Lipo 2000转染后,GFP质粒只是进入细胞并表达GFP蛋白,发出荧光,但是质粒本身不能利用细胞提供的材料复制。
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6楼
2010-07-09 09:04:11
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