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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 综合其他 » 【求助/交流】请问转染了GFP的肿瘤细胞？
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celeryliu

新虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】请问转染了GFP的肿瘤细胞？已有5人参与

请问用质粒转染了GFP的肿瘤细胞将其种植到小鼠身上后
GFP是随着细胞的增生复制还是平均分配到肿瘤细胞内，随着代数的增加，GFP会消失吗
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1楼2010-07-08 22:10:35
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-07-09 08:09:16
一般还是可以比较稳定遗传的（这里的遗传指的是子细胞也携带GFP），至少一个月
也就是你说的增生复制
但由于稳定株的染色体是被你插了东西进去的，所以可能在长期复制的过程中会出问题，但能够满足你的实验的，荷瘤顶多就一两个月
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2楼2010-07-08 22:58:26
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celeryliu

新虫 (正式写手)
谢谢
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3楼2010-07-09 06:21:21
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
这取决于你的转染是不是瞬时转染。
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4楼2010-07-09 08:43:08
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celeryliu

新虫 (正式写手)
我是用质粒转染的，应该是稳转吧
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5楼2010-07-09 09:02:11
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celeryliu

新虫 (正式写手)
那为什么有的同学说即使稳定转染也不能复制GFP
他的解释如下：
因为构建GFP质粒的时候用的是细菌的启动子，这个是经典的构建质粒的方法。真核细胞里面没有GFP质粒复制的材料，所以不能复制。代数往下传后，质粒的含量就越来越少，最后就检测不到荧光了。用Lipo 2000转染后，GFP质粒只是进入细胞并表达GFP蛋白，发出荧光，但是质粒本身不能利用细胞提供的材料复制。
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6楼2010-07-09 09:04:11
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk:额~~这个回答有点~~~ 2010-07-09 10:11:54
引用回帖:
Originally posted by celeryliu at 2010-07-09 09:04:11:
那为什么有的同学说即使稳定转染也不能复制GFP
他的解释如下：
因为构建GFP质粒的时候用的是细菌的启动子，这个是经典的构建质粒的方法。真核细胞里面没有GFP质粒复制的材料，所以不能复制。代数往下传后，质粒 ...

那是他自己活该没有选择好表达系统……
赞一下(2人) 回复此楼
7楼2010-07-09 09:07:40
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小听1213

新虫 (初入文坛)
★
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不会吧！！！在我的瞬转和稳转的实验里 GFP都是能稳定传代的 但是当到了一定的代数 会出现丢失的现象
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8楼2013-01-29 23:13:16
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曼爱生物

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by celeryliu at 2010-07-09 09:02:11
我是用质粒转染的，应该是稳转吧

首先，你这句话就是错的，瞬转稳转都是用质粒转的，其次既然要在细胞里面表达GFP当然就要选真核表达载体，含SV40复制原点的质粒系统和含EBV复制原点的质粒系统了
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宁做凤尾不做鸡头
9楼2015-03-24 19:47:22
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