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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】电击转化
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weiminhb

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】电击转化 已有4人参与

最近要做电击转化，将一个10kb左右的质粒转到假单胞菌中，请问有什么需要特别注意的地方吗？如何提高转化率？望高手指点，谢了。
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1楼 2010-05-10 18:39:41
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jinhx87

至尊木虫 (知名作家)
★ ★
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plantaqp(金币+1):谢谢回帖交流 2010-05-12 04:24:41
关键是做好电击转化感受态。
就是电转缓冲液是关键。
电击参数大都大同小异。
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2楼2010-05-11 07:13:28
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todouhy

铜虫 (小有名气)
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plantaqp(金币+1):谢谢回帖交流 2010-05-12 04:25:00
引用回帖:
Originally posted by jinhx87 at 2010-05-11 07:13:28:
关键是做好电击转化感受态。
就是电转缓冲液是关键。
电击参数大都大同小异。

电转化感受态细胞的制备和化学感受态细胞的相同吗，有什么注意事项啊，我最近也要做这个，要建一个质粒库，所以希望做过的人给点指点啊，谢谢啊！
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3楼2010-05-11 21:57:10
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen
★ ★
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plantaqp(金币+1):谢谢回帖交流 2010-05-12 04:25:08
1：在低温环境下操作，保证转化的质粒和细胞混合液没有气泡！
2：无菌操作！
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Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
4楼2010-05-11 22:02:40
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weiminhb

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by todouhy at 2010-05-11 21:57:10:

电转化感受态细胞的制备和化学感受态细胞的相同吗，有什么注意事项啊，我最近也要做这个，要建一个质粒库，所以希望做过的人给点指点啊，谢谢啊！

电转化感受态细胞关键是要除去离子，用ddH2O，10%甘油洗涤后，尽可能除去离子
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5楼2010-05-12 10:11:28
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