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ymzfeng

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[交流] 【求助/交流】转基因表达载体构建已有4人参与

最近想将拟南芥的一个基因转入烟草中，请问哪位高手知道构建基因表达载体有什么要求吗？它与超表达载体有什么区别？我想用pCambia1301来做，可它的MCS在启动子后面，不知怎么插入片段

还望高手指教
谢谢！

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1楼 2010-06-19 16:57:54

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ben1147

木虫 (正式写手)

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过表达载体是表达载体的一种

MCS就是要在promoter后面啊，这样才能把外源基因置于特定启动子的控制之下，实现组成型高表达

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2楼2010-06-19 17:28:07

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pan琳lin

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lstt09nk:这个以前看过，貌似是载体的要求什么的~~ 2010-06-19 18:21:39

①能在宿主细胞中复制繁殖，而且最好要有较高的自主复制能力。

  ②容易进入宿主细胞，而且进入效率越高越好。

  ③容易插入外来核酸片段，插入后不影响其进入宿主细胞和在细胞中的复制。这就要求载体DNA上要有合适的限制性核酸内切酶位点。

  ④容易从宿主细胞中分离纯化出来，这才便于重组操作。

  ⑤有容易被识别筛选的标志，当其进入宿主细胞、或携带着外来的核酸序列进入宿主细胞都能容易被辨认和分离出来。这才介于克隆操作。