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aofeng860308

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】PCR重复不出来,怎么回事? 已有14人参与

以前做过的PCR,结果很明显,可是最近接连做了好几遍,都没有出结果,得到的是一条很亮的非特异性条带!PCR体系完全一样,这是怎么回事,请高手指点!
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zemin_fang

木虫 (正式写手)

PCR几种试剂,一个一个换,进行验证。
2楼2010-06-23 17:09:33
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peilaming

铁虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
PCR就这样,实际上看起来很简单,P出来了什么都简单,一旦出不来原因就很多,不知道从哪里找。最可能还是引物吧
3楼2010-06-23 17:18:54
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wjune1127

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我的也是 。。。超级郁闷中
人生若只如初见,何事秋风悲画扇
4楼2010-06-23 18:07:34
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虫子火箭兵

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
PCR这个东西影响因素太多,一不小心就有可能P不出来,做实验前应冷静心态,状态不好就不要做了。
5楼2010-06-23 19:42:16
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aofeng860308

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by zemin_fang at 2010-06-23 17:09:33:
PCR几种试剂,一个一个换,进行验证。

水没有问题,每次都拿新的!
酶和buffer应该也没有问题,能扩增出来杂带!
引物换过了,重新稀释的!
模板也换过,新的旧的一个样!
但是还是出不来结果,郁闷……
6楼2010-06-24 13:30:49
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aofeng860308

木虫 (正式写手)

lmzxcom1:你引物怎么保存的,会不会污染后降解了 2010-06-24 19:38:37
引用回帖:
Originally posted by peilaming at 2010-06-23 17:18:54:
PCR就这样,实际上看起来很简单,P出来了什么都简单,一旦出不来原因就很多,不知道从哪里找。最可能还是引物吧

就是,影响因素太多了!引物重新稀释过的,也是一样!
7楼2010-06-24 13:32:31
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aofeng860308

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by wjune1127 at 2010-06-23 18:07:34:
我的也是 。。。超级郁闷中

8楼2010-06-24 13:33:05
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aofeng860308

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 虫子火箭兵 at 2010-06-23 19:42:16:
PCR这个东西影响因素太多,一不小心就有可能P不出来,做实验前应冷静心态,状态不好就不要做了。

就是,但是实验总得做,没办法啊……
9楼2010-06-24 13:34:01
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haoqian6135

木虫 (正式写手)

蜗牛~


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
PCR仪没有问题吧  换一个别的实验室的仪器试试   别人p的正常吗
平和悦衲!
10楼2010-06-24 16:36:39
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