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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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xpb2005

兑换贵宾

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

[交流] 【求助/交流】有关GC Buffer的问题？ 已有3人参与

我用TAKRA的GC Buffer 1进行PCR，说明书上建议50微升的体系， dNTP(各2.5mM)加了8微升，想知道为什么加这么多呢？不是很理解,望高手指点、
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1楼 2010-06-11 17:27:10
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snzydong

专家顾问

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
DNTP 加那么多是没有问题的啊 你按照说明书做应该没有问题 当然 你如果觉得很费的话 你可以加4UL 一样可以扩
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3楼2010-06-12 16:36:58
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ben1147

超级版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+2):谢谢交流！:tiger06: 2010-06-11 23:21:20
dNTP能和Mg2+结合，如果体系中Mg2+浓度较高，就等于变相降低了dNTP浓度，所以要多加一点dNTP。

GC Buffer的Mg2+浓度比较高（没记错的话，TaKaRa的2X貌似是5mM，终浓度2.5mM），他家普通的Taq酶配的10X buffer是15mM，终浓度1.5mM。所以dNTP浓度相应高一点。
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2楼2010-06-11 18:32:55
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