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[交流] 【求助/交流】有关GC Buffer的问题？已有3人参与

我用TAKRA的GC Buffer 1进行PCR，说明书上建议50微升的体系， dNTP(各2.5mM)加了8微升，想知道为什么加这么多呢？不是很理解,望高手指点、

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1楼 2010-06-11 17:27:10

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ben1147

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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+2):谢谢交流！:tiger06: 2010-06-11 23:21:20

dNTP能和Mg2+结合，如果体系中Mg2+浓度较高，就等于变相降低了dNTP浓度，所以要多加一点dNTP。

GC Buffer的Mg2+浓度比较高（没记错的话，TaKaRa的2X貌似是5mM，终浓度2.5mM），他家普通的Taq酶配的10X buffer是15mM，终浓度1.5mM。所以dNTP浓度相应高一点。