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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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骑着蜗牛追火箭

木虫 (著名写手)

纳米小生

[交流] 【求助/交流】大家的MTT法OD值是多少? 已有5人参与

大家好,我最近做MTT,新手上路,OD值只有0.1-0.2,有人说太小,大家一般是多少?
我的做法是这样的,5000cell/孔,接种后过夜。一排八孔,设两排。一排只有细胞,用培养基培养,一排有细胞,并且有我的样品。A1孔为调零孔,没有细胞,其它操作与其它孔均相同。MTT5mg/mL,加入20uL,4h后,小心吸出上清液,加入150mLDMSO,振荡,检测。
做出来的图看起来还可以,就是OD值太小。想说明的是我的样品没有毒,也不影响细胞增殖,所以没有用成活率来做图。
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weiyanbme

木虫 (正式写手)

★ ★
骑着蜗牛追火箭(金币+3):我也想过,可是这样就看不出来增殖情况了 2010-06-03 11:42:12
1949stone(金币+2):谢谢交流 2010-06-03 12:42:56
引用回帖:
Originally posted by 骑着蜗牛追火箭 at 2010-06-03 11:33:35:
大家好,我最近做MTT,新手上路,OD值只有0.1-0.2,有人说太小,大家一般是多少?
我的做法是这样的,5000cell/孔,接种后过夜。一排八孔,设两排。一排只有细胞,用培养基培养,一排有细胞,并且有我的样品。A1 ...

个人觉得数值可以的,0.7以下最好了,你要是嫌小不好看的话,就比上空白组,用百分比来做图,好看些
2楼2010-06-03 11:41:06
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weiyanbme

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 骑着蜗牛追火箭 at 2010-06-03 11:33:35:
大家好,我最近做MTT,新手上路,OD值只有0.1-0.2,有人说太小,大家一般是多少?
我的做法是这样的,5000cell/孔,接种后过夜。一排八孔,设两排。一排只有细胞,用培养基培养,一排有细胞,并且有我的样品。A1 ...

再问下,你加MTT之前,每孔内的体积为多少啊,一般200微升,加20微升后,就稀释10倍
3楼2010-06-03 11:43:36
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dhd997

荣誉版主 (文坛精英)

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骑着蜗牛追火箭(金币+3):谢谢,我用的细胞量是5000.不知道跟细胞种类有没有关系 2010-06-03 14:25:18
0.3-0.7都可以。看细胞量。
人生不过几十年,成败荣辱都在天,是非恩怨莫在意,健康快乐最值钱,自古人间苦无边,看得高远境如仙,愿你不为凡事恼,轻松快乐每一天。
4楼2010-06-03 12:14:48
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ff1983

金虫 (小有名气)

骑着蜗牛追火箭(金币+3):培养时间长点,OD值会增加,但也不高 2010-06-03 14:25:48
这个要看你的细胞量了,如果你的细胞增殖的快的话,OD值可能高些.
5楼2010-06-03 13:45:05
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dhd997

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骑着蜗牛追火箭(金币+2):很多人说,5000时的偏差最小,所以我选了这个细胞数量。 2010-06-03 17:10:20
细胞量好像有点大,另外还要看你的细胞的生长速度。
人生不过几十年,成败荣辱都在天,是非恩怨莫在意,健康快乐最值钱,自古人间苦无边,看得高远境如仙,愿你不为凡事恼,轻松快乐每一天。
6楼2010-06-03 14:42:41
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dhd997

荣誉版主 (文坛精英)

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★ ★
lstt09nk(金币+2):热心虫友,欢迎交流~~ 2010-06-03 18:49:20
骑着蜗牛追火箭(金币+4):谢谢,我打算接种后培养两天再接药 2010-06-04 09:08:09
其他按规范操作,应该是细胞生长达到对数期70%-80%的时候进行加药。

另外就是你的细胞活力如何。这个也可以想象,如果每个细胞半死不活的,细胞再多,甲瓒也不会太多。如果细胞活力很大,少量的细胞估计甲瓒也足够了。
所有细胞量的多少要探索好的。

还有我用过不同品牌的MTT好像吸光值不太一样,我也不知道为啥,不过值得注意单因素,一直用同一个品牌的比较好吧。
人生不过几十年,成败荣辱都在天,是非恩怨莫在意,健康快乐最值钱,自古人间苦无边,看得高远境如仙,愿你不为凡事恼,轻松快乐每一天。
7楼2010-06-03 17:43:02
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coolman007

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你种的是什么细胞,不同细胞 种板的密度不一样,有的细胞长的快 那就种少点,有的细胞长的慢, 那你就种多点
8楼2010-06-04 10:58:51
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dhd997

荣誉版主 (文坛精英)

自由人,我型我秀!

优秀版主


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我们培养的肝癌细胞,培养一天就可以加药了。
人生不过几十年,成败荣辱都在天,是非恩怨莫在意,健康快乐最值钱,自古人间苦无边,看得高远境如仙,愿你不为凡事恼,轻松快乐每一天。
9楼2010-06-04 11:06:47
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食品科学2012

铜虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
OD值(490nm)0.3-1.0
10楼2012-11-27 11:55:58
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