应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 【求助】液相柱堵了怎么办
221/3返回列表123下一页
查看: 1690  |  回复: 21
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

pkming

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助】液相柱堵了怎么办已有14人参与

柱子：X-Bridge C18(4.6*150,3.5)
流动相：A: 0.1M NaAc水溶液+乙腈（93+7），用乙酸调pH=6.5; B：乙腈+水（80+20）。梯度洗脱       
样品：氨基酸和异硫氰酸苯酯（PITC）衍生化得到。
做2次就被堵了，保留时间前移1min左右，柱压在1ml/min水流动相时已经超过最大值4000。经检查确实是柱子堵了。分析可能是盐沉积或者样品吸附在色谱柱上，就用超纯水/甲醇（95/5）冲洗1d，后用水-甲醇-四氢呋喃-甲醇-水冲洗一天，后用水以0.05ml/min反冲洗40min，柱压有所下降，但是还是比高（水/甲醇95/5以0.5ml/min冲洗柱压还有3000之高）

着是无奈，请各位虫虫伸出援助之手，指点一二。必感激涕零
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼2010-05-28 08:22:29
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

luomuwuhen

金虫 (著名写手)
pkming(金币+5): 2010-05-28 10:09:22
楼主可以反冲柱子，先用水，然后水-甲醇-四氢呋喃-甲醇-水小流速过夜，或者水-乙腈-异丙醇-乙腈。楼主可以看一下柱子的说明书，上边都会有怎么处理类似盐析出的解决方法
赞一下 回复此楼
药物合成
2楼2010-05-28 08:33:42
 已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhongweixu

铁杆木虫 (著名写手)
pkming(金币+2): 2010-05-28 10:11:39
这种情况看样子只能反冲了
赞一下 回复此楼
3楼2010-05-28 09:12:01
 已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yjj1314

金虫 (小有名气)
pkming(金币+3): 2010-05-28 10:12:04
10%甲醇水反冲柱子试试，流速0.5ml/min。我的柱子就是这么冲好的
赞一下 回复此楼
4楼2010-05-28 09:13:07
 已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pkming

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by luomuwuhen at 2010-05-28 08:33:42:
楼主可以反冲柱子，先用水，然后水-甲醇-四氢呋喃-甲醇-水小流速过夜，或者水-乙腈-异丙醇-乙腈。楼主可以看一下柱子的说明书，上边都会有怎么处理类似盐析出的解决方法

反冲流速和时间怎么把握，如果时间久了会不会影响柱子。我找了说明书，没有讲盐析后怎样办，只是说极性物质污染用你说的溶剂正向冲洗
赞一下 回复此楼
5楼2010-05-28 10:11:18
 已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pkming

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by yjj1314 at 2010-05-28 09:13:07:
10%甲醇水反冲柱子试试，流速0.5ml/min。我的柱子就是这么冲好的

这个流速是否太大，你用的是什么柱子？反冲时间是多久？谢谢
赞一下 回复此楼
6楼2010-05-28 10:12:47
 已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangxinlei

★
pkming(金币+1):谢谢参与
pkming(金币+5): 2010-05-28 10:21:28
你做的PITC氨基酸衍生实验，这个条件一定要把PITC除干净，否则进样，2针肯定堵柱子。而且是永久性损害柱子，估计你的柱子是恢复不过来了。现在做氨基酸分析已经不流行PITC了，用AccQ Tag方法或OPQ&FMOC的方法比较好。建议使用这两个方法。
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2010-05-28 10:19:22
 已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pkming

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by yangxinlei at 2010-05-28 10:19:22:
你做的PITC氨基酸衍生实验，这个条件一定要把PITC除干净，否则进样，2针肯定堵柱子。而且是永久性损害柱子，估计你的柱子是恢复不过来了。现在做氨基酸分析已经不流行PITC了，用AccQ Tag方法或OPQ&FMOC的方法 ...

谢谢，确实存在这方面的问题，所以我每次都用正己烷萃取3次。这个方法我看文献中用的挺多的，所以也就选了。
真的没有办法恢复柱子了么？
赞一下 回复此楼
8楼2010-05-28 10:22:50
 已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xu_713

金虫 (正式写手)
★
pkming(金币+1):谢谢参与
pkming(金币+1): 2010-05-28 10:48:46
楼主   直接再买吧    下次要注意了    我去我们公司做氨基酸的检测  他们都很不情愿的！！怕堵
赞一下(1人) 回复此楼
(⊙o⊙)…口水是淹不死我滴！
9楼2010-05-28 10:26:41
 已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangxinlei

pkming(金币+2): 2010-05-28 10:48:53
如果按你说的那样反冲了还是堵的话估计是恢复不过来了，如果你还有同样一根用过的旧柱子，可以打开柱头，更换一点填料，再看看。
赞一下 回复此楼
10楼2010-05-28 10:27:47
 已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 pkming 的主题更新
221/3返回列表123下一页
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 评正教授需要两个国家级项目，有人用子课题糊弄，结果在评审前资格公示时被举报拿下了 +22 瞬息宇宙 2024-11-12 31/1550 2024-11-15 22:02 by 潇湘之迷
[论文投稿] chemical science和advanced science哪个好一点 +6 yly150 2024-11-12 6/300 2024-11-15 21:06 by hcj9909053
[论文投稿] 国内期刊审稿人数量 +3 新时代核动力驴 2024-11-13 5/250 2024-11-15 20:37 by 新时代核动力驴
[考博] 随缘读博 一篇中科院一区Top 一篇中科院二区Top 两篇专利 +6 Ricoch4t 2024-11-13 15/750 2024-11-15 19:24 by 青青之洲
[论文投稿] 找不到审稿人 +6 吉祥如意141913 2024-11-13 6/300 2024-11-15 16:48 by LEyblyt
[论文投稿] 职称论文 +10 xiaoqi_66 2024-11-09 13/650 2024-11-15 16:45 by sugarmei
[基金申请] 博后面上太难了 +14 不安定因素 2024-11-14 17/850 2024-11-15 16:05 by lupbao
[有机交流] 二甲胺的使用 20+5 太阳谷 2024-11-14 13/650 2024-11-15 13:11 by xiaomei1031
[硕博家园] reject后小感 +6 sioc-sunj 2024-11-14 8/400 2024-11-15 11:50 by 畅21
[硕博家园] 课题和专业一点都不相关怎么办 +7 imt4n9 2024-11-11 10/500 2024-11-15 01:55 by 成长虫
[论文投稿] OE返修遇到expired +3 隔壁老王来了 2024-11-14 7/350 2024-11-14 20:46 by 隔壁老王来了
[硕博家园] 研究生的生活该是什么样 +4 lqy0719 2024-11-14 4/200 2024-11-14 16:45 by 阿荣喝酒
[有机交流] 同一个反应回流情况不同 20+3 1853846 2024-11-12 3/150 2024-11-14 15:42 by 太阳谷
[硕博家园] 大龄已婚想读博如何 +15 米娅阳 2024-11-11 18/900 2024-11-14 14:18 by xiaomi0401
[找工作] 咨询一下江西的高校待遇，人文氛围怎么样? +5 akslis2024 2024-11-09 5/250 2024-11-14 13:53 by 啄木鸟、
[基金申请] 浙江省青基怎么看A还是B？ +8 ToallGoof 2024-11-11 14/700 2024-11-13 09:11 by Praybest
[论文投稿] 二审审一年的佛系编辑 +10 thefoxrain 2024-11-09 15/750 2024-11-12 19:27 by lide966
[论文投稿] 论文接受后，编辑部发邮件提醒缺少附件 15+4 上善若水明泪 2024-11-10 4/200 2024-11-12 14:24 by 北京莱茵润色
[论文投稿] 爱思唯尔投稿系统里的通讯作者可以和文章里的通讯作者标注不同吗 +7 Omnissiah 2024-11-10 7/350 2024-11-12 14:07 by holypower
[基金申请] 要求论文发表日期在项目执行期内，论文发表日期是在线日期还是见刊日期 +6 Jiangnanyu1 2024-11-09 7/350 2024-11-10 17:49 by jurkat.1640
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭