24小时热门版块排行榜    

查看: 1737  |  回复: 21
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

pkming

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助】液相柱堵了怎么办已有14人参与

柱子:X-Bridge C18(4.6*150,3.5)
流动相:A: 0.1M NaAc水溶液+乙腈(93+7),用乙酸调pH=6.5; B:乙腈+水(80+20)。梯度洗脱       
样品:氨基酸和异硫氰酸苯酯(PITC)衍生化得到。
做2次就被堵了,保留时间前移1min左右,柱压在1ml/min水流动相时已经超过最大值4000。经检查确实是柱子堵了。分析可能是盐沉积或者样品吸附在色谱柱上,就用超纯水/甲醇(95/5)冲洗1d,后用水-甲醇-四氢呋喃-甲醇-水冲洗一天,后用水以0.05ml/min反冲洗40min,柱压有所下降,但是还是比高(水/甲醇95/5以0.5ml/min冲洗柱压还有3000之高)

着是无奈,请各位虫虫伸出援助之手,指点一二。必感激涕零
回复此楼
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pkming

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by yangxinlei at 2010-05-28 10:19:22:
你做的PITC氨基酸衍生实验,这个条件一定要把PITC除干净,否则进样,2针肯定堵柱子。而且是永久性损害柱子,估计你的柱子是恢复不过来了。现在做氨基酸分析已经不流行PITC了,用AccQ Tag方法或OPQ&FMOC的方法 ...

谢谢,确实存在这方面的问题,所以我每次都用正己烷萃取3次。这个方法我看文献中用的挺多的,所以也就选了。
真的没有办法恢复柱子了么?
8楼2010-05-28 10:22:50
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 22 个回答

luomuwuhen

金虫 (著名写手)

pkming(金币+5): 2010-05-28 10:09:22
楼主可以反冲柱子,先用水,然后水-甲醇-四氢呋喃-甲醇-水小流速过夜,或者水-乙腈-异丙醇-乙腈。楼主可以看一下柱子的说明书,上边都会有怎么处理类似盐析出的解决方法
药物合成
2楼2010-05-28 08:33:42
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhongweixu

铁杆木虫 (著名写手)

pkming(金币+2): 2010-05-28 10:11:39
这种情况看样子只能反冲了
3楼2010-05-28 09:12:01
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yjj1314

金虫 (小有名气)

pkming(金币+3): 2010-05-28 10:12:04
10%甲醇水反冲柱子试试,流速0.5ml/min。我的柱子就是这么冲好的
4楼2010-05-28 09:13:07
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 读博的欲望达到了巅峰 +17 小丸九 2024-12-17 17/850 2024-12-23 11:35 by s150535912
[论文投稿] 三个手稿 10+4 s爱吃芒果 2024-12-22 8/400 2024-12-23 11:15 by bobvan
[硕博家园] 纠结退学ing +17 幽皮皮皮 2024-12-22 28/1400 2024-12-23 10:40 by 幽皮皮皮
[文学芳草园] 生活的意义 +4 宋昙 2024-12-20 4/200 2024-12-23 10:40 by 漠海漠王
[硕博家园] 只想摆烂 +6 s150535912 2024-12-23 6/300 2024-12-23 10:15 by 问道游潜
[找工作] 柔引引进博士硕士。 +21 大发财树 2024-12-18 22/1100 2024-12-23 09:32 by Demo呆萌
[考博] 求老师哦! +5 景小凯 2024-12-20 5/250 2024-12-23 08:58 by 19881327
[职场人生] 国企、民企行业不同,如何决择? +8 haihe623 2024-12-19 10/500 2024-12-23 08:20 by 芳飞千里
[硕博家园] 寻45-50的博士教授 +9 大发财树 2024-12-22 9/450 2024-12-23 00:24 by 雪径踏青
[论文投稿] MDPI投稿连续拒稿是什么原因?文章质量不好吗?还是其他原因? 2+9 多听多看多学 2024-12-17 18/900 2024-12-22 19:20 by jurkat.1640
[硕博家园] 有未就业的博士吗? +9 大发财树 2024-12-22 9/450 2024-12-22 13:36 by 25v11@c6
[硕博家园] “认怂了”还是“认清了”:青年博士纷纷“逃离”科研的背后…… +14 柏舟0000 2024-12-16 15/750 2024-12-22 10:50 by 大发财树
[论文投稿] 投稿期刊 5+4 王丽媛西西西 2024-12-17 7/350 2024-12-22 04:44 by yudaoqian88
[考博] 华南理工大学 “新能源交叉创新团队--主动安全”课题组招收海外联合培养博士生 +4 hubble 2024-12-20 5/250 2024-12-21 16:16 by 那片叶落
[教师之家] 今年的科研绩效只奖励Q1了 +12 holypower 2024-12-20 17/850 2024-12-21 16:13 by willbuilder
[教师之家] 学校排名靠前发展好,最大的受益者是校领导还是普通老师? +6 akslis2024 2024-12-17 7/350 2024-12-21 11:22 by 凌晨一点393
[考博] 有偿聘请兼职硕士 +10 大发财树 2024-12-19 10/500 2024-12-20 17:30 by mopsite
[论文投稿] 求推荐5分二区以上肿瘤接受生信结合实验的期刊。。。 +3 lice_1987 2024-12-17 6/300 2024-12-19 17:01 by Andy_124
[教师之家] 删了哦 (EPI+-1)(金币-50) +5 原因在哪里 2024-12-18 6/300 2024-12-19 12:25 by keikofans
[论文投稿] 论文投稿 +4 @星尘@ 2024-12-17 6/300 2024-12-19 09:39 by YXLSYJK
信息提示
请填处理意见