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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】酚仿抽提质粒
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chengkun

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】酚仿抽提质粒 已有8人参与

各位高手，最近我提质粒没有用试剂盒，改用饱和酚-氯仿抽提。我的问题是，当加入溶液iii后，离心，取上清，上清液中加入等体积的酚-氯仿，然后混匀，请问这一步我是剧烈的上下混匀做法对不对？还是应该轻柔的混匀？谢谢。
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1楼 2010-05-21 20:41:38
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gastrodia

金虫 (正式写手)
★
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无需轻柔，此时混匀可以涡旋，对质粒无影响，我经常这样做，而且提得质粒酶切，转化都没问题，加入酚氯仿剧烈震荡才能变性蛋白，详情见分子克隆

[ Last edited by gastrodia on 2010-5-21 at 22:46 ]
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4楼2010-05-21 22:40:30
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hxw2009

银虫 (小有名气)

轻弹

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
以前做的时候，老师教的用手指轻轻弹。生物类的东西都不要太剧烈。
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2楼2010-05-21 20:43:47
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yujiaping1

木虫 (著名写手)
★ ★
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lstt09nk(金币+1):同意~~ 2010-05-22 13:14:07
来回颠倒，但是一定要缓慢轻柔
不太同意楼上的弹，因为是萃取，就应该来回颠倒，让两相混合充分，不过生物的东西尽量轻柔是对的
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3楼2010-05-21 20:49:53
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
剧烈震荡效果才好!
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5楼2010-05-22 10:32:53
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