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chengkun

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】酚仿抽提质粒 已有8人参与

各位高手,最近我提质粒没有用试剂盒,改用饱和酚-氯仿抽提。我的问题是,当加入溶液iii后,离心,取上清,上清液中加入等体积的酚-氯仿,然后混匀,请问这一步我是剧烈的上下混匀做法对不对?还是应该轻柔的混匀?谢谢。
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yujiaping1

木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):同意~~ 2010-05-22 13:14:07
来回颠倒,但是一定要缓慢轻柔
不太同意楼上的弹,因为是萃取,就应该来回颠倒,让两相混合充分,不过生物的东西尽量轻柔是对的
3楼2010-05-21 20:49:53
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hxw2009

银虫 (小有名气)

轻弹


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
以前做的时候,老师教的用手指轻轻弹。生物类的东西都不要太剧烈。
2楼2010-05-21 20:43:47
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gastrodia

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
无需轻柔,此时混匀可以涡旋,对质粒无影响,我经常这样做,而且提得质粒酶切,转化都没问题,加入酚氯仿剧烈震荡才能变性蛋白,详情见分子克隆

[ Last edited by gastrodia on 2010-5-21 at 22:46 ]
4楼2010-05-21 22:40:30
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
剧烈震荡效果才好!
5楼2010-05-22 10:32:53
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